(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202110882261.0 (22)申请日 2021.08.02 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113499326 A (43)申请公布日 2021.10.15 (73)专利权人 广西馨海药业科技有限公司 地址 545000 广西壮 族自治区柳州市 鱼峰 区葡萄山路7号洛维工业集中区科技 孵化项目2号厂房第一层 (72)发明人 高红伟　杨世林　 (74)专利代理 机构 北京远大卓悦知识产权代理 有限公司 1 1369 专利代理师 许文宗 (51)Int.Cl. A61K 9/72(2006.01)A61K 31/704(2006.01) A61K 36/71(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61K 125/00(2006.01) (56)对比文件 CN 111249291 A,2020.0 6.09 CN 112315934 A,2021.02.0 5 审查员 刘应梅 (54)发明名称 白头翁皂苷B4雾化吸入制剂及应用 (57)摘要 本发明公开了一种白头翁皂苷B4雾化吸入 制剂， 所述雾化吸入制剂 包括B4溶液或B4纳米制 剂。 B4溶液将白头翁皂苷B4溶解在生理盐水中， B4纳米制剂 包括： 将白头翁皂苷B4用乙醇配制成 浓度为2.5 ‑10mg/mL的溶液， 置于常温环境， 得到 B4乙醇溶液， 将吐温80用水配制成质量分数为 0.02％的溶液， 置于0 ‑4℃冷藏， 得到水相溶液； 冰盐浴条件下， 将B4乙醇溶液快速加入其20 ‑30 倍体积的水相溶液， 水相溶液搅拌速度保持在 900‑2000r/min， 搅拌时间不短于4min， 析出的为 药物纳米晶体。 本发明通过与T NFR2蛋白和Foxp3 蛋白结合， 从而抑制T NFR2和Foxp3及Treg细胞发 挥作用。 权利要求书1页 说明书8页 附图6页 CN 113499326 B 2022.07.01 CN 113499326 B 1.白头翁皂苷B4雾化吸入制剂的制备方法， 其特征在于， 白头翁皂苷B4雾化吸入制剂 为B4纳米制剂， 制备 方法包括： 将白头翁皂苷B4用乙醇配制成浓度为2.5 ‑10mg/mL的溶液， 置于常温环境， 得到B4乙醇 溶液， 将稳定剂用水配制成质量分数为0.01 ‑0.03％的溶液， 置于0 ‑4℃冷藏， 得到水相溶 液； 冰盐浴条件下， 将B4乙醇溶液快速加入其20 ‑30倍体积的水相溶液， 水相溶液搅拌速度 保持在90 0‑2000r/min， 搅拌时间不短于4mi n， 析出的为药物纳米晶体。 2.如权利要求1所述的白头翁皂苷B4雾化吸入制 剂的制备方法， 其特征在于， 得到的药 物纳米晶体的粒径不大于10 00nm。 3.如权利要求1所述的白头翁皂苷B4雾化吸入制 剂的制备方法， 其特征在于， 冰盐浴条 件为‑15℃， 碎冰与NaCl以4:1重量比混合。 4.如权利要求1所述的白头翁皂苷B4雾化吸入制 剂的制备方法， 其特征在于， 水相溶液 的初始温度为3℃。 5.如权利要求1所述的白头翁皂苷B4雾化吸入制剂的制备方法， 其特征在于， B4乙醇溶 液的初始温度为20℃。 6.如权利要求1所述的白头翁皂苷B4雾化吸入制 剂的制备方法， 其特征在于， 水相溶液 搅拌速度保持在120 0r/min。 7.如权利要求1所述的白头翁皂苷B4雾化吸入制剂的制备方法， 其特征在于， B4乙醇溶 液与水相溶 液的体积比为1:3 0。 8.如权利要求1 ‑7任一项所述的制备 方法得到的白头翁皂苷B4雾化吸入制剂。 9.如权利 要求8所述的白头翁皂苷B4雾化吸入制剂在制备TNFR2和Foxp3蛋白抑制剂中 的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113499326 B 2白头翁皂苷B4雾化吸入制剂及应用 技术领域 [0001]本发明涉及医药技术领域。 更具体地说， 本发明涉及一种白头翁皂苷B4雾化吸入 制剂及应用。 背景技术 [0002]白头翁是毛茛科白头翁属植物白头翁(Pulsatilla  chinensis(Bunge)Regel)的 干燥根， 具有清热解毒、 凉血止痢的功效。 现代药理学研究表明， 白头翁中皂苷类成分是其 主要活性成分， 具有增强免疫功能、 抗炎等作用。 白头 翁皂苷B4是白头 翁中提取具有 药理活 性的五环三萜类皂苷， 其具有抗炎抗菌、 免疫调节、 抗氧化、 抗病毒等药理作用。 2015版 《中 国药典》 一部白头翁含量测定项规定： 白头翁皂苷B4含量 不得少于4.6％。 发明内容 [0003]本发明的一个目的是解决至少上述问题， 并提供至少后面将说明的优点。 [0004]本发明还有一个目的是提供一种白头翁皂苷B4雾化吸入制剂及应用， 其通过与 TNFR2蛋白和Foxp3蛋白结合， 从而抑制TNFR2和Foxp3及Treg细胞发挥作用。 [0005]为了实现根据本发明的这些目的和其它优点， 提供了一种白头翁皂苷B4雾化吸入 制剂， 所述雾化吸入制剂包括B4溶 液或B4纳米制剂。 [0006]优选的是， B4溶液的制备方法为： 将白头翁皂苷B4溶解在生理盐水中， 浓度达到5 ‑ 25mg/mL。 [0007]优选的是， B4纳米制剂的制备 方法为： [0008]将白头翁皂苷B4用乙醇配制成浓度为2.5 ‑10mg/mL的溶液， 置于常温环境， 得到B4 乙醇溶液， 将稳定剂用水配制成质量分数为0.01 ‑0.03％的溶液， 置于0 ‑4℃冷藏， 得到水相 溶液； [0009]冰盐浴条件下， 将B4乙醇溶液快速加入其20 ‑30倍体积的水相溶液， 水相溶液搅拌 速度保持在90 0‑2000r/min， 搅拌时间不短于4mi n， 析出的为药物纳米晶体。 [0010]优选的是， 得到的药物纳米晶体的粒径不大于10 00nm。 [0011]优选的是， 冰盐 浴条件为 ‑15℃， 碎冰与NaCl以4:1重量比混合。 [0012]优选的是， 水相溶 液的初始温度为3℃。 [0013]优选的是， B4乙醇溶 液的初始温度为20℃。 [0014]优选的是， 水相溶 液搅拌速度保持在120 0r/min。 [0015]优选的是， B4乙醇溶 液与水相溶 液的体积比为1:3 0。 [0016]所述的白头翁皂苷B4雾化吸入制剂作为TNFR2和Foxp3蛋白抑制剂的应用。 [0017]本发明至少包括以下有益效果： [0018]第一、 本发明进行体外实验： ①计算机模拟白头翁皂苷B4(B4)与TNFR2结合力； ② 利用放线菌素D和TNF诱导WEHI ‑13var细胞检测B4对细胞死亡的保护作用； ③将TNFR2报告 基因质粒转入Jurkat细胞中， 检测B4对TNFR2的影 响；④从C57BL/6小鼠淋巴结分离T淋巴细说　明　书 1/8 页 3 CN 113499326 B 3