(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202110832368.4 (22)申请日 2021.07.2 2 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113564252 A (43)申请公布日 2021.10.2 9 (73)专利权人 中国医学 科学院北京协和医院 地址 100070 北京市东城区王府井帅府园1 号 (72)发明人 常梦琪　王任直　包新杰　王子豪　 冯铭　陈亦豪　姜燊种　 (74)专利代理 机构 北京慧尚知识产权代理事务 所(特殊普通 合伙) 11743 专利代理师 鲍晓芳 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01)C12Q 1/6858(2018.01) G01N 33/574(2006.01) G01N 33/573(2006.01) A61K 45/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) 审查员 赵亚丽 (54)发明名称 甲基化酶M ETTL3的新用途 (57)摘要 本发明公开了一种垂体生长激素腺瘤诊断 试剂， 所述诊断试剂 包括检测METTL3表达 水平的 试剂； 和/或， 检测METT L3调控的靶基因甲基化水 平的试剂。 本发明公开了METTL3在 垂体生长激 素 腺瘤中表达显著升高， 其靶基因GNAS在垂 体腺瘤 细胞中甲基化升高， 因此， 可将METTL3及其靶基 因GNAS用于制备诊断或治疗垂体生长激素腺瘤 产品的用途， 并为寻找新型垂 体生长激素腺瘤诊 断相关的肿瘤标记物或新的治疗策略对于垂体 生长激素腺瘤的控制提供新的方向。 权利要求书1页 说明书7页 序列表2页 附图3页 CN 113564252 B 2022.09.02 CN 113564252 B 1.检测GNAS甲基化水平的试剂在制备垂体生长激素腺瘤诊断产品中的应用， 所述GNAS 甲基化水平在垂体生长 激素腺瘤患者中显著升高。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述试剂包括定量检测GNAS表达量的引物 和抗体。 3.METTL3的抑制剂在制备预防或治疗垂体生长激素腺瘤的药物 组合物中的应用； 所述 METTL3的抑制剂为干扰RNA； METT L3 抑制剂通过抑制METTL3表达， 抑制GNAS表达和m6A甲基 化修饰水平， 进 而调控垂体生长 激素腺瘤的成瘤能力和体内激素 水平。 4.根据权利要求3所述的应用， 其特 征在于， 所述干扰RNA包括siRNA和shRNA。 5.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 所述siRNA序列为SEQ  ID NO:5‑6和/或SEQ   ID NO:7‑8所示； 所述shRNA序列为SEQ  ID NO:9所示。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113564252 B 2甲基化酶MET TL3的新用途 技术领域 [0001]本发明涉及生物医药 领域， 具体涉及甲基化酶M ETTL3的新用途。 背景技术 [0002]垂体GH腺瘤引起肢端肥大症， 是一种常见的激素分泌型垂体前叶细胞肿瘤。 临床 表现为肿瘤的占位效应和高水平的激素导致患者 继发全身多系统合并症， 严重降低患者的 生活质量， 增加 患者死亡率。 目前临床治疗主要以手术为第一治疗方案， 但由于许多侵袭性 垂体大腺瘤侵犯海绵窦或颅底结构， 无法完全切除， 其他治疗手段存在副作用和耐药性， 需 要额外的治疗策略。 因此迫切需要更准确和全面地理解垂体GH腺瘤发生相关的分子生物学 特征， 开发新的治疗 靶点。 [0003]RNA m6A甲基化修饰是可逆的化学修饰， 甲基化调控由甲基转移酶复合物 (METTL3、 METTL14、 WTAP等)、 去甲基化酶(FTO和ALKBH5)协同进行， 同时结合蛋白(YTHDF 1‑3 和YTHDC1 ‑2等)与之结合行使生物学功能。 RNA  m6A具有调控RNA的剪切、 翻译、 稳定性以及 核转运等功能， 参与脂肪形成、 精子发生、 干细胞命运以及免疫调控等诸多生物学过程。 基 于m6A在以上多种 生命功能中的重要性， m6A修饰及其相关蛋白的失调引起疾病的发生。 多 个研究团队在肿瘤干细胞或细胞系中发现m6A调控蛋白的表达和m6A 修饰水平发生变化， 从 而引起肺癌、 肝癌、 乳腺癌、 白血病、 胶质瘤、 膀胱癌等的发生。 这些研究成果表明以m6A 为切 入点研究肿瘤学， 有助于全面推进肿瘤发病机制的研究， 从而在m6A调控的通路中寻找 新的 肿瘤靶向的治疗 方法。 在此状况下， 以RNA  m6A甲基化为代表的表观转录组学将有望为垂体 GH腺瘤的研究开辟新的前 景。 发明内容 [0004]为了弥补现有技术的不足， 本发明的目的在于提供一种与垂体生长激素腺瘤相关 的靶标METTL3及其对应的靶基因， 为垂体生长 激素腺瘤诊断及治疗提供一种产品和手段。 [0005]为实现上述目的， 本发明具体技 术方案如下： [0006]本发明第一方面提供了一种垂体生长激素腺瘤诊断试剂， 所述诊断试剂包括检测 METTL3表达水平的试剂； 和/或， 检测M ETTL3调控的靶基因表达水平或甲基化水平的试剂。 [0007]进一步， 所述M ETTL3调控的靶基因为GNAS。 [0008]进一步， 与正常对照相比， 所述METTL3表达及其催化的GNAS甲基化水平在垂体生 长激素腺瘤样本中显著升高。 [0009]进一步， 所述试剂包括定量检测M ETTL3和/或GNAS表达量的引物和抗体。 [0010]进一步， 所述引物的核苷酸序列包括： [0011]上游引物M ETTL3‑F： CCCTATGGGACCCTGACAGA， SEQ  ID NO:3； [0012]下游引物M ETTL3‑R： TGACAC CAACCAAGCAGTGT， SEQ  ID NO:4。 [0013]上游引物GNAS ‑F： GCAGAAGGACAAGCAGGTCT， SEQ  ID NO:1； [0014]上游引物GNAS ‑R： TTCTCACCATCGCTGT TGCT， SEQ ID NO:2。说　明　书 1/7 页 3 CN 113564252 B 3