(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202110863519.2 (22)申请日 2021.07.2 9 (71)申请人 苏州科锐迈 德生物医药 科技有限公 司 地址 215123 江苏省苏州市自由贸易试验 区苏州片区苏州工业园区新平街388 号腾飞科技园23 栋201单元 (72)发明人 左炽健　杨嘉丽　朱佳凤　杜雅冉　 赵阳　孙振华　 (74)专利代理 机构 北京林达刘知识产权代理事 务所(普通 合伙) 11277 专利代理师 刘新宇　李茂家 (51)Int.Cl. C12N 15/62(2006.01) A61K 38/53(2006.01)A61K 48/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 环状RNA分子及其在目标蛋白的靶向降解中 的应用 (57)摘要 本公开属于生物医药领域， 具体来说， 本公 开涉及一种环状RNA分子、 环化前体RNA分子、 重 组核酸分子、 重组表达载体、 重组宿主细胞、 组合 物及其在目标蛋白的靶向降解中的应用， 以及一 种预防或治疗疾病的方法。 环状RNA分子具有良 好的透膜性， 易于向胞内递送， 具有高效的体内 蛋白靶向降解活性。 本公开的环状RNA分子成功 实现了对肿瘤生长抑制， 首次证明了bio ‑ PROTACs的体内蛋白降解活性， 为肿瘤等疾病的 治疗提供了积极、 有效的治 疗方案。 权利要求书2页 说明书28页 序列表44页 附图4页 CN 114591986 A 2022.06.07 CN 114591986 A 1.一种环状RNA分子， 其中， 所述环状RNA分子编码具有目标效应活性的重组多肽， 所述 目标效应活性 为目标蛋白的靶向降解活性。 2.根据权利要求1所述的环状RNA分子， 其中， 所述重组多肽包括靶向结合所述目标蛋 白的第一多肽， 和与所述第一多肽融合的第二多肽， 所述第二多肽具有E3泛素连接酶的酶 活性； 可选地， 所述重组多肽还 包含连接所述第一多肽与所述第二多肽的连接肽。 3.根据权利要求1或2所述的环状RNA分子， 其中， 所述目标蛋白为跨膜蛋白或细胞内蛋 白； 优选地， 所述目标蛋白为疾病相关蛋白； 可选地， 所述疾病相关蛋白为肿瘤相关蛋白。 4.根据权利要求2或3所述的环状RNA分子， 其中， 所述第 一多肽为靶向结合所述目标蛋 白的抗体、 抗体片段或抗原结合多肽。 5.根据权利要求2 ‑4任一项所述的环状RNA分子， 其中， 所述第二多肽选自E3泛素连接 酶或其功能片段； 可选地， 所述E3泛素连接酶的功能片段包含如下的任一种： HECT结构域、 RING结构域或U ‑box结构域。 6.根据权利要求2 ‑5任一项所述的环状RNA分子， 其中， 所述第二多肽选自CRBN、 VHL、 MDM2、 cIAP、 β TrCP、 FBW7、 S POP、 SKP2、 D DB2、 SOCS2、 ASB1、 C HIP或上述任一种的功能片段。 7.根据权利 要求1‑6任一项所述的环状RNA分子， 其中， 所述环状RNA分子包括编码所述 重组多肽的编码区序列， 和与所述编码区序列可操作地连接的IRES序列。 8.根据权利 要求7所述的环状RNA分子， 其中， 环状RNA分子还包括如 下的一种或两种以 上的序列： 第二外 显子序列、 第一外 显子序列、 5 ’间隔序列、 3 ’间隔序列； 优选地， 所述环状RNA分子包括顺次连接的如下所示序列： 第二外显子序列、 5 ’间隔序 列、 IRES序列、 编码区序列、 3 ’间隔序列和第一外 显子序列。 9.根据权利要求1 ‑8任一项所述的环状RNA分子， 其中， 所述目标效应活性为受试者体 内的目标蛋白的靶向降解活性； 优选地， 所述环状RNA分子被施用于受试者体内； 可选地， 所述环状RNA分子通过口服、 腹膜内、 静脉内、 动脉内、 肌肉内、 皮内、 皮下、 经 皮、 鼻腔、 经直肠， 肿瘤体内注射、 肿瘤腔内留置、 神经鞘内注射、 蛛网膜下腔注射或系统性 施用， 优选为肿瘤体内注射。 10.一种环化前体RNA分子， 其中， 所述环化前体RNA分子环化形成根据权利要求1 ‑9任 一项所述的环状RNA分子； 可选地， 所述环化前体RNA分子包括 顺次连接的如下 所示序列： 5’同源臂序列、 3 ’内含子序列、 第二外显子序列、 5 ’间隔区序列、 IRES序列、 编码区序 列、 3’间隔区序列、 第一外 显子序列、 5 ’内含子序列和3 ’同源臂序列。 11.一种重组核酸分子， 其中， 所述重组核酸分子转录形成根据权利要求10所述的环化 前体RNA分子 。 12.一种重组表达载体， 其中， 所述重组表达载体包含根据权利要求11所述的重组核酸 分子。 13.一种重组宿主细胞， 其中， 所述重组宿主细胞包含根据权利要求1 ‑9任一项所述的 环状RNA分子， 根据权利要求10所述的环化前体RNA分子， 根据权利要求11所述的重组核酸 分子， 或根据权利要求12所述的重组表达载体。 14.一种组合物， 其中， 所述组合物包括根据权利要求1 ‑9任一项所述的环状RNA分子；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114591986 A 2可选地， 所述组合物还 包括一种或多种药 学上可接受的载体。 15.根据权利 要求1‑9任一项所述的环状RNA分子， 根据权利 要求10所述的环化前体RNA 分子， 根据权利要求11所述的重组核酸分子， 根据权利要求 12所述的重组表达载体， 根据权 利要求13所述的重组宿主细胞， 或根据权利要求14所述的组合物在如下(a) ‑(d)至少一种 中的用途： (a)目标蛋白的靶向降解， 优选受试者体内的目标蛋白的靶向降解； (b)降低或消除目标蛋白的表达， 优选降低或消除受试者体内的目标蛋白的表达； (c)作为或制备目标蛋白的靶向降解的试剂， 优选作为或制备受试者体内的目标蛋白 的靶向降解的试剂； (d)作为或制备治疗 疾病的药物， 优选作为或制备治疗肿瘤的药物。 16.一种预防或治疗疾病的方法， 其中， 包括向受试者施用根据权利要求1 ‑9任一项所 述的环状RNA分子， 根据权利要求10所述的环化前体RNA分子， 根据权利要求11所述的重组 核酸分子， 根据权利要求12所述的重组表达载体， 根据权利要求 13所述的重组宿 主细胞， 或 根据权利要求14所述的组合物； 可选地， 所述施用选自口服、 腹膜内、 静脉内、 动脉内、 肌肉内、 皮内、 皮下、 经皮、 鼻腔、 经直肠， 肿瘤体内注 射、 肿瘤腔内留置、 神经鞘内注射、 蛛网膜下腔注射 或系统性施用； 优选 为肿瘤体内注射。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114591986 A 3