(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111023468.9 (22)申请日 2021.09.01 (71)申请人 南通市肿瘤医院 地址 226361 江苏省南京市通州区平潮镇 通扬北路3 0号 (72)发明人 赵文静　杨磊　滕静静　沈爱国　 (74)专利代理 机构 南京申云知识产权代理事务 所(普通合伙) 32274 代理人 邱兴天 (51)Int.Cl. C12N 15/113(2010.01) C12N 15/867(2006.01) A61K 31/713(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/04(2006.01) (54)发明名称 激活胃癌细胞中PRDM5表达的saRNA及其应 用 (57)摘要 本发明公开了一种激活胃癌细胞中PRDM5表 达的saRNA及其应用， 属于生物医药技术领域。 本 发明针对胃癌细胞中被异常沉默的抑癌基因 PRDM5， 从转录起始位点TSS上游 ‑1kb处开始， 并 选定大小为21bp的靶 点设计， 首次合成了saRNA 。 该saRNA分子的功效具有特异性高、 专一性强的 优点， 高效激活被沉 默的PRDM5基因， 不上调其他 基因的表达。 该saRNA可有力抑制胃癌细胞的增 殖能力、 迁移能力并增加化疗药物5 ‑FU的药物敏 感性， 可以用于制备安全可靠、 高效的抗胃癌药 物。 权利要求书1页 说明书5页 序列表2页 附图6页 CN 113881667 A 2022.01.04 CN 113881667 A 1.一种激活胃癌细胞中PRDM 5表达的saRNA分子， 其特 征在于， 包括以下双链RNA分子： 正义链5′ ‑AAAUUUCCUAGACCGCAGGGU‑3′， 反义链5′ ‑ACCCUGCGGUCUAGGAAAUUU‑3′； 或 正义链5′ ‑AUGGCAGGAACGGAUCCGGGC‑3′， 反义链5′ ‑GCCCGGAUCCGUUCCUGCCAU‑3′。 2.权利要求1所述的激活胃癌细胞中PRDM5表达的saRNA分子在制备抗胃癌药物中的应 用。 3.根据权利要求2所述的应用， 其特征在于， 所述抗胃癌药物包括延长胃癌患 者生存期 的药物。 4.据权利要求2所述的应用， 其特征在于， 所述抗胃癌药物包括抑制胃癌细胞增殖的药 物。 5.据权利要求2所述的应用， 其特征在于， 所述抗胃癌药物包括抑制胃癌细胞迁移的药 物。 6.一种saRNA重组载体， 其特征在于， 所述saRNA重组载体含有权利 要求1所述的激活胃 癌细胞中PRDM 5表达的saRNA分子的序列。 7.一种抗胃癌药物， 其特征在于， 含有权利要求1所述的激活胃癌细胞中PRDM5表达的 saRNA分子或权利要求6所述的saRNA重组载体。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113881667 A 2激活胃癌细胞 中PRDM5表达的s aRNA及其应用 技术领域 [0001]本发明属于生物医药技术领域， 更具体地说， 涉及一种激活胃癌细胞中  PRDM5表 达的saRNA及其应用。 背景技术 [0002]胃癌仍然是全球重要的癌 症之一， 仅 2018年新增的胃癌病例就超过100万， 成为了 世界第五大常见癌症， 死亡人数约为78.3万， 约占所有 死亡病例的1/12， 是第三大癌症死亡 原因。 受环境因素及经济医疗水平的制约， 东亚地区胃癌的发病率最高。 由于钡光镜或 内镜 检查等胃癌筛查项目的开展， 早在2009 年， 日本和韩国的胃癌的早期检出率上升到50％。 因 此， 日本和韩国的胃癌5年生存率非常高， 分别为64.6％和70.4％。 近年来， 随着医疗 水平及 国民早癌筛查意识的提高， 中 国的早期胃癌检出率大大提高， 胃癌的死亡率也在逐年下降。 在过去的几十年里， 各种治疗方法的综合运用显著提高了早期胃癌患者的生存时间， 但进 展期胃癌的预后没有明显改善。 当胃癌被确诊时多数已经是晚期， 而晚期胃癌的预后通常 较差， 5年总生存率低于10％。 因此， 更好地了解胃癌的发病机制和分子事件有助于建立新 的诊断技 术、 治疗方案和预防策略。 [0003]PRDM5(也称为PFM2)是PRDM基因家族的一员， 通常位于4q25 ‑26区域。 PRDM5蛋白最 初是根据其N端保守的PR结构域从表达序列标签(Exp ressed Sequenc e Tag， EST)数据库中 鉴定出来的， 这些结构域通常具有序列特异性的  DNA结合活性。 但是， PRDM5的PR结构域不 具备同型半胱氨酸甲基转移酶  (Homocysteine  Methyltran sferase， HMT)活性， 其招募HMT 的活动特异地定位于H3的K9位置。 从机制上来看， PRDM5不能直接甲基化组蛋白； 然而， 在不 同的细胞环境中， 它被证明能够通过招募G9A组蛋白甲基转移酶和组蛋白去乙酰化酶而作 为转录抑制因子； 相反地， 它能通过促进转录单位内RNA聚合酶II(PolII)的延长或通过结 合增强子而作为转录激动剂。 另外有研究表明，  PRDM5可能通过调节Wnt/β ‑catenin信号通 路参与重要的生理病理过程。 在生理环境下， PRDM5在生长发育中的具有重要的作用， 它的 失活可以引起造血功能损害和角膜骨骼 等的缺陷。 在炎症环 境中的病理机制， PRD M5被证明 具有参与并促进炎性细胞凋亡的功。 因HP感染引发的胃炎是促发胃癌发生的重要病因之 一。 所以， 研 究者进一步探索了PRDM5在肿 瘤中扮演的角色。 在实体瘤中， PRDM5的启动子含 有CpG岛， 在肿瘤中其CpG岛多被高度甲基化， 导致其在 多种癌细胞系中的表达沉默， 故而认 为它可能具有抑制肿瘤的活性。 发明内容 [0004]针对现有技术存在的上述问题， 本发明所要解决的技术问题在于提供一种激 活胃 癌细胞中PRDM5表达的saRNA。 本发明所要解决的另一技术问题在于提供前述saRNA在制备 抗胃癌药物中的应用。 本发明所要解决的最后一技术问题在于提供一种利用前述saRNA制 备的抗胃癌药物。 [0005]为了解决上述 技术问题， 本发明所采用的技 术方案如下：说　明　书 1/5 页 3 CN 113881667 A 3