(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202110776782.8 (22)申请日 2021.07.09 (66)本国优先权数据 202010676464.X 2020.07.14 CN (71)申请人 迈威 （上海） 生物科技股份有限公司 地址 201210 上海市浦东 新区李冰路576号 （创想园） 3号楼4楼 申请人 江苏迈威康新药研发有限公司 (72)发明人 章燕珍　任杰　梅菲　汤沛霈　 陈坤　谭小钉　 (51)Int.Cl. C07K 16/28(2006.01) A61K 39/395(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 抗PD-1抗体及其稳定制剂 (57)摘要 本发明提供了一种结合人PD ‑1的抗体或其 片段， 含有所述抗人PD ‑1的抗体或其片段的组合 物， 所述组合物优选为水针制剂。 本发明的抗体 利用杂交瘤技术筛选获得与人PD ‑1胞外区结构 域重组蛋白和细胞表面人PD ‑1均具有高亲和力 结合， 并且能特异性阻断PD ‑1/PD‑L1、 PD‑1/PD‑ L2配受体结合的抗体分子317， 进一步通过人源 化技术获得亲和力和特异性保持不变的人源化 抗体h317。 根据抗原 ‑抗体晶体复合物结构解析， 构建h317轻、 重链CDR区突变体， 获得317系列衍 生抗体。 在抗人PD ‑1抗体h317的基础上， 经过三 轮组分选 择、 浓度优化提供的抗体稳定制剂提高 了抗体的储存 稳定性和温度适应性， 延长了所述 抗体制剂特别是 水针剂的保存期。 权利要求书2页 说明书27页 序列表5页 附图4页 CN 113929781 A 2022.01.14 CN 113929781 A 1.一种抗体或其抗原结合片段， 所述抗体或其抗原结合片段包含重链可变区和轻链可 变区， 其中 所述重链可变区(VH)选自SEQ  ID NO:54或SEQ  ID NO:62； 所述轻链可变区(VL)选自SEQ  ID NO:52或SEQ  ID NO:60。 2.一种抗体或其抗原结合片段， 其是以权利要求1所述抗体或其抗原结合片段为出发 抗体， 根据出发抗体与PD ‑1抗原晶体复合物的结构解析， 通过CDR定向进化改造产生的， 至 少部分的保留了出发抗体对P D‑1的亲和力， 优选比出发抗体对P D‑1的亲和力高。 3.如权利要求2所述抗体或其抗原结合片段， 至少部分的保留了出发抗体对PD ‑1的亲 和力是指保留了出发抗体对PD ‑1亲和力的至少10％、 20％、 30％、 40％、 50％、 60％、 70％、 80％、 90％、 95％。 4.如权利要求2或3所述的抗体或其 抗原结合片段， 其特 征在于： 所述抗体或其抗原结合片段的轻链可变区与出发抗体轻链可变区相比， 在选自第24、 30、 32、 50、 55、 56、 91、 92、 93、 94、 96位中的一个或多个位 点存在氨基酸 突变； 和/或 所述抗体或其抗原结合片段的重链可变区与出发抗体重链可变区相比， 在选自第31、 32、 33、 52、 53、 54、 55、 56、 57、 100、 101、 10 6位中的一个或多个位 点存在氨基酸 突变； 所述轻链可变区的氨基酸残基位点编号根据SEQ  ID NO:60确定； 所述重链可变区的氨 基酸残基位 点编号根据SEQ ID NO:62确定 。 5.如权利要求 4所述的抗体或其 抗原结合片段， 其特 征在于： 所述抗体或其抗原结合片段的轻链可变区与出发抗体轻链可变区相比， 存在以下一个 或多个氨基酸置 换： K24R、 E30S、 V32A、 V 32Y、 W50A、 W50G、 H55A、 H55Q、 T56S、 Y91A、 Y91F、 S92D、 S92N、 R93N、 R93S、 Y94F、 W96G和W96 Y； 和/或 所述抗体或其抗原结合片段的重链可变区与出发抗体重链可变区相比， 存在以下一个 或多个氨基酸置 换： S31D、 Y32A、 Y32N、 D33S、 D33Y、 S52K、 S52W、 G53S、 G53Y、 G54D、 G54S、 G55S、 S56G、 Y57T、 Y59A、 Y59T、 D100E、 D100Y、 S101A和Y10 6T。 6.一种抗体或其抗原结合片段， 所述抗体或其抗原结合片段与权利要求1 ‑5任一所述 抗体或其 抗原结合片段 具有相同的轻链可变区CDRs和重链可变区CDRs。 7.如权利要求1 ‑6任一所述抗体或其抗原结合片段， 其为鼠源抗体、 嵌合抗体、 人源化 抗体、 Fab、 Fab'、 F(ab')2、 Fv、 scFv。 8.一种阻断PD ‑1与其配体相互作用的组合物， 包含权利要求1 ‑7任一所述的抗体或抗 原结合片段， 以及可选的药 学上可接受的辅料。 9.如权利要求8所述的组合物， 其特征在于经过37℃储存稳定性试验， 与试验前相比， 所述组合物在37℃储 存21天后， SEC>97％、 C EX>70％、 NR‑CE>95％。 10.如权利要求8或9所述的组合物， 其中所述药学上可接受的辅料包括一种或多种选 自缓冲液、 保护剂、 组成的组。 11.如权利要求8 ‑10任一所述的组合物， 其中包含的抗体或抗原结合片段的浓度为15 ‑ 40mg/mL。 12.如权利要求8 ‑10任一所述的组合物， 其中包含的缓冲液选自柠檬酸缓冲液、 琥珀酸 缓冲液、 组氨酸缓冲液、 磷酸缓冲液、 醋酸缓冲液、 Tris盐酸缓冲液； 浓度为5 ‑20mmol； pH值 为4.0‑8.0。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 113929781 A 213.如权利要求8 ‑10任一所述的组合物， 其中包含的保护剂选自蔗糖、 海藻糖、 甘露醇、 山梨醇； 浓度为3 ‑10％(w/v)。 14.如权利要求8 ‑10任一所述的组合物， 其中包含的表面活性剂选自聚山梨醇酯20、 聚 山梨醇酯 80、 EDTA、 精 氨酸。 15.一种组合物， 包括： 16.如权利要求15所述的组合物， 包括： 17.一种组合物， 包括： 18.一种稳定抗体的组合物， 其是在权利要求8 ‑17任一所述组合物的基础上省略了抗 体或其抗原结合片段组分。 19.权利要求18所述组合物在增强抗PD ‑1抗体稳定性和/或制备抗PD ‑1抗体制剂中的 应用。 20.权利要求1 ‑7任一所述抗体或其抗原结合片段或权利要求8 ‑17中任一项所述组合 物在制备 预防或治疗肿瘤或癌症药物中的应用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 113929781 A 3