(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202110950305.9 (22)申请日 2021.08.18 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113546045 A (43)申请公布日 2021.10.26 (73)专利权人 浙江大学 地址 310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘 路866号 (72)发明人 游剑　陆益超　李青坡　姜新东　 (74)专利代理 机构 杭州求是专利事务所有限公 司 33200 专利代理师 赵杭丽 (51)Int.Cl. A61K 9/107(2006.01) A61K 9/127(2006.01)A61K 9/51(2006.01) A61K 35/17(2015.01) A61K 39/00(2006.01) A61K 47/14(2006.01) A61K 47/22(2006.01) A61K 47/24(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (56)对比文件 CN 112569207 A,2021.0 3.30 审查员 杜俊 (54)发明名称 恢复肿瘤微环境失活树突状细胞功能的纳 米制剂及应用 (57)摘要 本发明提供恢复肿瘤微环境失活树突状细 胞功能的纳米制剂及应用， 能同时抑制肿瘤微环 境内DCs氧化应激和内质网应激来恢复其活力。 该纳米制剂将内质网应激抑制剂 装载于含ROS清 除剂的载体中， 改善肿瘤微环境内DCs “三高现 象”(高内质网与氧化应激、 高脂质堆积)和 “三低 现状”(低成熟、 低活力、 低浸润)， 从而 提升DCs的 数量和质量， 增强肿瘤免疫治疗效果。 该效果可 通过(1)直接纳米制剂的机体给药， (2)纳米制剂 预处理DCs的过继给药实现。 该纳米制剂可以是 纳米乳， 脂质体， 胶束或脂质纳米粒等载药系统， 该纳米系统可恢复机体抗肿瘤免疫蓝图， 具有 方 案新颖、 制备简单、 应用范围广、 同时适用于个性 化或普适 性治疗的特点。 权利要求书1页 说明书9页 附图7页 CN 113546045 B 2022.11.11 CN 113546045 B 1.一种纳米制剂在制备可恢 复体内外肿瘤微环境树突状细胞功能药物中的应用， 其特 征在于， 所述纳米制剂由油相和水相组成， 油相选用中链甘油三酯  5‑70%, w/w、 卵磷脂5 ‑ 70%, w/w、 ROS还原剂生育酚0.1 ‑50%, w/w、 油溶性的IRE1α ‑XBP1靶向抑制剂0.1 ‑30%, w/ w， 水相选用去离 子水； 所述纳米制剂的油相： 水相为0.01% ‑70 %， w/w。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特 征在于， 所述应用通过以下两种途径实现： （1） 该纳米制剂本身成药， 用以直接体内递送， 给药浓度为0.1  mg/kg‑100 mg/kg， 给药 途径为注射、 口服、 吸入、 腔道给 药、 透皮； （2） 该纳米制剂经体外处理DCs， 诱导后者成为能过继回输的细胞疫苗， 体外细胞给药 浓度为1 nM  ‑ 40 mM， 体外诱导分化的同种异体或自体初始DCs或者用肿瘤抗原、 肿瘤细胞 裂解液活化的DCs经 过上述载药纳米制剂处 理1‑48 h后成为防治性DCs疫苗。 3.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述纳米制剂为水包油 型纳米乳， 或脂质 体、 胶束、 脂质纳米粒。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113546045 B 2恢复肿瘤微环境失活树突状细胞功能的纳米制剂及应用 技术领域 [0001]本发明属于制药领域， 涉及恢复肿瘤微环境失活树突状细胞功能的纳 米制剂及应 用。 是一类可体内外恢复肿瘤微环境树突状细胞功 能的纳米制剂， 可以再激活患者体内树 突状细胞， 保障过继的树 突状细胞疫苗的功能与分布， 可在抗肿瘤领域的应用。 背景技术 [0002]肿瘤是严重威胁人类健康与生存质量 的恶性疾病之一， 而树突状细胞(DCs)是患 者体内用于对抗这种恶性疾病最重要的免疫细胞之一。 DCs是机体功能最强的专职性抗原 呈递细胞(AP Cs),对于激活与维持先天性和适应性免疫， 以及促进T细胞多样性活化有着不 可或缺的作用。 体内的D Cs可以在肿瘤微环 境采样“可疑”分子， 通过抗原(交叉)呈递到主要 组织相容性复合物分子(MHC)I与MHC  II分子上， 随后在淋巴结内将抗原信息传递给其他 DCs或者B细胞等APCs， 并起到刺激T细胞效应分化为细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)的作用。 此 外， 分布在肿瘤区域的DCs也可以在肿瘤位点直接招募大量T细胞(包括过继的CAR ‑T与TCR‑ T)， 起到原位再活化与扩增T细胞的作用， 这对于提高肿瘤杀伤T细胞的浸润至关重要。 [0003]虽然瘤区浸润的DCs对于肿瘤排斥或者肿瘤消退有着不可替代的重要作用， 但是 这类DCs也常常会受到免疫抑制性肿瘤微环 境的影响， 导致DCs胞内活性氧(ROS)大量升高， 造成后续DCs内质网(ER)压力激增。 随后引起ER应激传感器需要肌醇的激酶1α(IRE1α ) ‑X‑ 盒状结合蛋白1(XBP1)异常激活， 诱导DCs合成远超正常情况的脂质， 并以脂滴的形式大量 蓄积， 这些异常储存的脂质可以被胞内冗余的ROS过氧化， 生 成的过氧化脂质副产 物又会进 一步引起ER应激。 并且， 过于强烈的ER应激与氧化应激可能与肿瘤部位D Cs的凋亡与浸润减 少相关。 同时， 不正常堆积的脂质致使与不成熟D Cs相关的脂肪酸氧化以及氧化磷酸化水平 提高， 影响了DCs活化必须的糖酵解代谢重组的启动， 导致DCs成熟激活失败。 总之， 肿瘤部 位对DCs来说是一把双刃剑， 既充满机遇， 又面临挑战， D Cs有机会在瘤区捕获肿瘤特异 性抗 原与肿瘤相关抗原， 从而启动患者体内正常免疫功 能； 与此同时复杂的肿瘤微环境又会通 过种种因素提高DCs的氧化应激与ER应激， 严重削弱了DCs的功能与数量。 [0004]正因为DCs处于免疫应答的中心位置， 并且通常患者体内的DCs在肿瘤发展的早期 阶段就被排除， 临床上常通过大规模过继体外活化的DCs疫苗的方式， 调动体内DCs、 T细胞 以及NK细胞等免疫细胞的抗肿瘤 “积极性”， 来提高病人整体的抗肿瘤应答。 这类DC s疫苗往 往分离或分化于自体或者同源异体健康志愿者， 经过全肿瘤裂解物或者多种肿瘤相关/特 异性抗原脉冲， 以及佐剂处理后， 进行回输。 sip uleucel‑T(商品名Provenge)是具有里程碑 意义的DCs疫苗， 它 是目前批准用于转移性去势抵抗性前列腺癌的首个基于疫苗的免疫疗 法， 也是美国唯一批准的基于细胞的疫苗[Nat  Rev Drug Discov,2010,9(7):513 ‑514.]。 目前也有多项涉及DCs疫苗的I ‑III期临床试验进行中 ， 其中肾细胞癌[Hum   VaccImmunother,2013,9(6):1217 ‑1227]、 前列腺癌[J  Immunother,2015,38(2):71 ‑76]、 黑色素瘤[Clin  Cancer Res,2016,22(9):2155 ‑2166]以及胶质瘤[Cancers,2 018,10(10): 372]中是较为常见的治疗模型。 但是这些DCs疫苗过继后可能依旧受到抑制性微环境的影说　明　书 1/9 页 3 CN 113546045 B 3