(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202110916954.7 (22)申请日 2021.08.10 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113750218 A (43)申请公布日 2021.12.07 (73)专利权人 南通市肿瘤医院 地址 226361 江苏省南 通市通州区平潮镇 通扬北路3 0号 (72)发明人 吴雨萌　沈爱国　岳燕萍　杨磊　 (74)专利代理 机构 南京申云知识产权代理事务 所(普通合伙) 32274 专利代理师 邱兴天 (51)Int.Cl. A61K 38/17(2006.01) A61P 35/00(2006.01)C12N 15/12(2006.01) C12N 15/867(2006.01) 审查员 吴至芳 (54)发明名称 多肽ZC3H12A及其突变体在制备抗肝癌药物 中的应用 (57)摘要 本发明公开了多肽ZC3H12A及其突变体在制 备抗肝癌药物中的应用， 属于生物技术领域。 本 发明利用生物工程技术， 将多肽ZC3H12A及突变 体分别重组到GV347真核诱导表达载体， 经酶切 和序列分析证明重组成功后包装成诱导表达病 毒， 将此重组质粒转通过病毒染肝癌细胞Huh7中 构建稳转细胞系， 免疫印记检测蛋白的表达。 免 疫共沉淀实验结果证明， 多肽ZC3H12A及其突变 体ZC3H12AC157A与MYC mRNA具有直接相互作用， 同时可以降解MYC  mRNA。 CCK8实验证明在肿瘤细 胞中过表达ZC3H12A和ZC3H12AC157A可以降低MYC   mRNA水平从而抑制肿瘤细胞的增殖。 权利要求书1页 说明书5页 序列表9页 附图4页 CN 113750218 B 2022.05.20 CN 113750218 B 1.多肽ZC3H12AC157A在制备抗肝癌药物中的应用； 所述多肽ZC3H12AC157A的序列如SEQ  ID  NO .4所示。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特征在 于， 构建含有编码所述多肽ZC3H 12AC157A的核酸 的表达载体， 将所述表达载体由病毒载体进行包 装， 作为降低肝癌细胞增殖能力的药物。 3.根据权利要求2所述的应用， 其特征在于， 所述的表达载体为GV347真核Tet  on表达 载体。 4.根据权利要求2所述的应用， 其特 征在于， 所述的病毒载体为慢病毒载体。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113750218 B 2多肽ZC3H12A及其突变体在制备抗肝癌药物中的应用 技术领域 [0001]本发明属于生物技术领域， 更具体地说， 涉及多肽ZC3H12A及其突变体在制备抗肝 癌药物中的应用。 背景技术 [0002]肝癌是世界全世界范围内常见的消化系统恶性肿瘤。 根据2018年公布的数据， 全 球肝癌的年新 发病例居于恶性肿瘤第6位， 是第二大恶性肿瘤致死原因。 靶向药物的研发一 直是肝癌治疗的热点研究方向， 随着靶向药物的开发及应用显著提高了肿瘤患者的生存时 间。 尽管如此， 目前靶向药物仍旧满足不了临床的需求。 [0003]c‑Myc(MYC)蛋白失调控是人类肿瘤发生的主要驱动因素， 作为一种重要的转录因 子， MYC与MAX的形成异源二聚体结合到靶基因启动子内的Eb ox基序(CACGTG)结合， 通过募 集转录共激活子调控靶基因转录的启动、 暂停释放和延伸， 从而影响人类基因组中约 15％ 的基因。 在正常情况下MYC的蛋白和mRNA水平受到严格控制， 但在大多数人类癌症 中MYC变 得失控和过度表达。 MYC的过量表达可通过逆转录病毒启动子插入、 染色体易位/扩增、 MYC 基因内超级增强子的激活和/或上游信号通路的突变来增强MYC的稳定性。 在转基因小鼠模 型中的研究表明， 即使是短暂的MYC失活也会引起肝脏肿瘤的退化， 这表明调控致癌的MYC 可以用于治疗癌症患者。 [0004]以MYC为靶点的靶向药物研发一直是临床抗肿瘤药物研发的热点， 由于转录因子 一些固有的特性使直接靶向MYC蛋白设计药物非常 困难， 目前的研究策略集中在靶向MYC转 录调控和靶向MYC翻译后调控层面， 相关药物目前多属于临床前阶段。 但目前尚无直接靶向 降解MYC mRNA的药物。 [0005]ZC3H12A是一种锌指 蛋白， 最初被发现于经MCP ‑1处理的人外周血单核细胞中， 具 有转录因子、 RNA酶、 去泛素化酶等作用。 发明内容 [0006]针对现有技术存在的上述问题， 本发明所要解决的技术问题在于提供多肽 ZC3H12A及其突变体在制备抗肝癌药物中的应用。 本发明所要解决的另一技术问题在于提 供含有多肽ZC3H12A及其突变体的抗肝癌药物。 [0007]为了解决上述 技术问题， 本发明所采用的技 术方案如下： [0008]多肽ZC3H12A在制备抗 肝癌药物中的应用。 [0009]所述的应用是构建含有编码所述多肽ZC3H12A的核酸 的表达载体， 将所述表达载 体由病毒载体进行包 装， 作为降低肝癌细胞增殖能力的药物。 [0010]进一步地， 所述的表达载体为GV347真核 Tet on表达载体。 [0011]进一步地， 所述的病毒载体为慢病毒载体。 [0012]一种抗肝癌药物， 是一种包装有表达载体 的病毒载体， 所述表达载体含有编码所 述多肽ZC 3H12A的核酸。说　明　书 1/5 页 3 CN 113750218 B 3