(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202110757553.1 (22)申请日 2021.07.0 5 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113521281 A (43)申请公布日 2021.10.2 2 (73)专利权人 四川大学 地址 610065 四川省成 都市武侯区一环路 南一段24号 (72)发明人 黄忠兵　刘涛涛　尹光福　廖晓明　 蒲曦鸣　 (51)Int.Cl. A61K 41/00(2020.01) A61K 9/50(2006.01) A61K 47/54(2017.01) A61K 47/62(2017.01) A61K 47/32(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (56)对比文件 CN 1085783 64 A,2018.09.28 CN 111265494 A,2020.0 6.12 CN 111514368 A,2020.08.1 1 CN 108245495 A,2018.07.0 6 CN 113000835 A,2021.0 6.22US 2016317992 A1,2016.1 1.03 KR 20200015026 A,2020.02.12 US 201324 4037 A1,2013.09.19 CN 106729738 A,2017.0 5.31 朱飘.纳米功能药物在高穿透性外源刺激下 的肿瘤治 疗. 《中国博士学位 论文电子期刊网》 .2021, Taotao L iu et al.Photothermal photodynamic therapy and enhanced radiotherapy of targeti ng copolymer- coated l iquid metal nan oparticles o n liver cancer. 《Co lloids and Surfaces B: Biointerfaces》 .2021, 熊建钧等.镓基液态金属微/纳米液滴的合 成及其. 《生物医学工程研究》 .2020, Svetlana A. C hechetka1 et al.L ight- driven l iquid metal nan otransformers for. 《NATURE COMMUNICATIONS》 .2017, (续) 审查员 李东果 (54)发明名称 具有光热光动力放射增敏肿瘤治疗液金微 球及其制备方法 (57)摘要 本发明公开了具有光热、 光动力和放射增敏 三种治疗肿瘤方式协同作用的液体金属微球及 制备方法。 先用酯化反应连接甲硝唑MN到聚乙二 醇‑聚丙烯酸PEG ‑PAA共聚链上， 制得放射增敏共 聚物PEG‑PAA‑MN； 再用迈克尔加成反应， 制 备靶 向肿瘤的共聚物RGD ‑PEG‑PAA‑MN； 用超声方法使 镓基液体金属破碎为纳米微球 （LM） ， 再经靶向共 聚物RGD‑PEG‑PAA‑MN在LM表面上静电包覆， 制备 液体金属纳米复合微球。 本发明工艺简单， 反应条件温和， 易于操作； 所制备产品具有光热、 复合 光动力、 乏氧下低强度放射增敏三种协同治疗肿 瘤的功能， 还有多肿瘤靶向性、 良好生物相容性、 体内可降解 性、 肿瘤乏氧响应和酸 性响应性能。 [转续页] 权利要求书2页 说明书7页 附图3页 CN 113521281 B 2022.08.16 CN 113521281 B (56)对比文件 Sanjay Kul karni et al.L iquid metal based theran ostic nan oplatform s: Application in cancer. 《Nan omedicine: Nanotechnology, Biology, and Medici ne》 .2020,2/2 页 2[接上页] CN 113521281 B1.一种具有光热光动力放射增敏肿瘤治疗液金微球， 其特征在于， 所述具有光热光动 力放射增敏肿瘤 治疗液金微球由聚乙二醇 ‑聚丙烯酸共聚物PEG ‑PAA、 1‑羟乙基‑2‑甲基‑5‑ 硝基咪唑MN和精氨酸 ‑甘氨酸‑天冬氨酸短肽RGD以及镓基液体金属LM作为原料， 经过酯化 反应、 迈克尔加成反应以及静电组装包覆而制备得到RGD ‑PEG‑PAA‑MN@LM； 所述肿瘤 治疗液 体金属微球的外层， 为所述聚丙烯酸 ‑聚乙二醇共聚物PEG ‑PAA与所述1 ‑羟乙基‑2‑甲基‑5‑ 硝基咪唑MN和短肽RGD， 通过酯化反应和迈 克尔加成反应 分别连接到P EG和PAA分子链上， 而 得到的MN、 RGD修饰的PAA ‑PEG共聚分子链RGD ‑PAA‑PEG‑MN， 其具有靶向肿瘤和射线增敏性； 所述肿瘤治疗液体金属 微球的内层， 为室温下 的镓基液体金属纳米微球， 具有光热和光动 力特性； 所述肿瘤治疗液体金属微粒， 为MN、 RGD修饰的RGD ‑PAA‑PEG‑MN共聚分子链通过静 电组装而包覆在液体金属微粒表面， 亲水的短肽RGD在复合微球最外面， 使肿瘤 治疗液体金 属微球具有靶向性； 所述肿瘤治疗液体金属 微球， 在近红外光照射下具有光热转换效应和 光动力性能， 在放射性辐照下具有光动力和射线增敏性能， 使得所述肿瘤治疗液体金属 微 球对于肿瘤具有光热、 光动力和射线增敏的协同作用。 2.一种具有光热光动力放射增敏肿瘤治疗液金微球的制备方法， 其特征在于， 包括以 下步骤： a)称量0.001～0.01g分子量1000～20000Da的聚丙烯酸(PAA)， 加入到装有10～30mL、 浓度为10mM、 pH值5.2的2 ‑(N‑吗啉代)乙磺酸缓冲液(MES)中； 然后再将0.15～0.45g的1 ‑ (3‑二甲氨基丙基) ‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC ·HCl)和0.07～0.21g的N ‑羟基琥珀酰亚 胺(NHS)加入到该缓冲液中； 室温下活化30min后得到溶液A， 再用300～900μL的三乙胺 (TEA)调节A溶液的pH值至7.2， 得到溶液B； 将分子量1000～20000Da、 一端含有马来酰亚胺 基MAL、 另一端含有氨基 NH2、 质量为0.2～0.6g的聚乙二醇(Mal ‑PEG‑NH2)加入到溶液B中； 室 温下反应48小时后， 用透析袋透析以去除其中未反应物； 最后冷冻干燥， 得到含有马来酰亚 胺端基的PEG ‑PAA白色粉末； b)将0.05～0.15g、 含有马来酰亚胺端基的PEG ‑PAA溶解在5～15mL的二甲亚砜(DMSO) 中； 随后将0.041～ 0.123g的EDC·HCl和0.009～ 0.027g的4 ‑二甲基氨基吡啶(DMAP)加入溶 液中； 在搅拌溶解后， 用100～300 μL的TEA调节溶液的pH值至7.2， 得到溶液C， 并室温反应2 小时； 同时将0.01～ 0.08g的1 ‑羟乙基‑2‑甲基‑5‑硝基咪唑(MN)溶解在1～ 6mL的DMSO中； 然 后， 以0.1～10mL/min的速率将MN溶液逐滴加 入溶液C中， 得到溶液D， 并在室温下避光反应 24小时； 再将反应溶液用截留分子量8000～14000Da的透析袋透析3天， 以去掉未反应物； 最 后， 冷冻干燥而得到 MN改性的PEG ‑PAA‑MN的白色粉末； c)将0.01～0.03g的PEG ‑PAA‑MN， 加入到通有氮气且避光的三口烧瓶中， 并加入10～ 30mL、 pH值为7.2的PBS溶液使其溶解； 再将0.005～0.015g、 带有异硫氰酸荧光素酯(FITC) 标记的精氨 酰‑甘氨酰‑天冬氨酸短肽(RGD)加入到溶液中， 得到溶液E， 并室温下避光反应2 ～72小时； 最后经透析、 冷冻干燥而得到的RGD和MN连接修饰的黄色嵌段共聚物粉末RGD ‑ PEG‑PAA‑MN； d)将0.01～0.03g的RGD ‑PEG‑PAA‑MN溶解在12～36mL、 体积比为2～20:1的无水乙醇和 水的混合溶液中； 再将 0.2～0.6g的镓基液体金属LM加入其中， 得到混合液体金属悬浊液F； 在冰浴中用100 ‑1000W的功率超声处理1～10小时， 然后共聚分子链静电组装包覆在镓基液 体金属微球表 面上的时间为0.1～1.0小时， 再用500～5000rpm的转速离心去除大尺 寸的液权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 113521281 B 3