(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202111006543.0 (22)申请日 2021.08.3 0 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113683701 A (43)申请公布日 2021.11.23 (73)专利权人 重庆医科 大学附属第二医院 地址 400010 重庆市渝中区临江路74 号 (72)发明人 刘杞　张玲　孙航　金艾顺　 黄丽利　马华峰　唐琳　黄文祺　 (74)专利代理 机构 重庆西南 华渝专利代理有限 公司 50270 专利代理师 熊礼 (51)Int.Cl. C07K 16/40(2006.01) C07K 16/22(2006.01) C12N 15/13(2006.01) C12N 15/85(2006.01)C12N 5/10(2006.01) A61K 39/395(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (56)对比文件 CN 101678076 A,2010.0 3.24 CN 1944460 A,2007.04.11 张臣丽.重组人肝再生增强因子单 克隆抗体 的制备和鉴定. 《免疫学杂》 .2010,第26卷(第1 1 期), 章波.抗人肝再生增强因子单 克隆抗体的研 制. 《免疫学杂志》 .20 00,第16卷(第6期), 刘瑞.肝再生增强因子单 克隆抗体的制备与 初步鉴定. 《黑龙江畜牧兽医》 .2016,(第08 期), 王彦芳.重组人ALR单 克隆抗体的制备、 鉴定 和初步应用. 《免疫学杂志》 .20 04,第20卷(第1 期), 审查员 杨振宇 (54)发明名称 人源化ALR人鼠嵌合单克隆抗体在肝癌和多 发性骨髓瘤治 疗中的应用 (57)摘要 本发明属于单克隆抗体技术领域， 具体公开 了一种人源化ALR人鼠嵌合单克隆抗体， 重链可 变区包括三个CDRs区域， 氨基酸序列分别为SEQ   ID NO:3、 SEQ  ID NO:4和SEQ  ID NO:5； 轻链可变 区包括三个CDRs区域， 氨 基酸序列分别为SEQ  ID  NO:6、 SEQ  ID NO:7和SEQ  ID NO:8。 本发明还公 开了上述人源化ALR人鼠嵌合单克隆抗体在肝癌 和多发性骨髓瘤治疗中的应用。 本发 明公开的人 源化ALR人鼠嵌合单克隆抗体为今后进一步研究 hALR在肝癌和多发性骨髓瘤发生、 发展过程中的 作用奠定 基础。 权利要求书1页 说明书20页 序列表3页 附图14页 CN 113683701 B 2022.08.09 CN 113683701 B 1.人源化ALR人鼠嵌合单克隆抗体， 其特征在于， 重链可变区包括三个CDRs区域， 其中， 重链CDR1氨基酸序列为SEQ  ID NO:3， 重链CDR2氨基酸序列为SEQ  ID NO:4， 重链CD R3氨基 酸序列为SEQ  ID NO:5； 轻链可变区包括三个CDRs区域， 轻链CDR1氨基酸序列为SEQ  ID NO: 6， 轻链CDR2 氨基酸序列为SEQ  ID NO:7， 轻链CDR3氨基酸序列为SEQ  ID NO:8。 2.鼠源单克隆抗体， 其特征在于， 重链的氨基酸序列为SEQ  ID NO:1， 轻链的氨基酸序 列为SEQ ID NO:2。 3.一种核酸， 其特 征在于， 编码权利要求1 ‑2任一项所述的单 克隆抗体的氨基酸序列。 4.一种载体， 其特 征在于， 包括权利要求3所述的核酸。 5.一种宿主细胞， 其特 征在于， 包括权利要求 4所述的载体。 6.一种组合物， 其特征在于， 包括(1)权利要求1 ‑2任一权利 要求所述的单克隆抗体； 或 (2)权利要求3所述的核酸； 或(3)权利要求 4所述的载体； 或(4)权利要求5所述的宿主细胞。 7.根据权利要求1 ‑2中任一权利要求所述的单克隆抗体在制备肝癌治疗药物中的应 用。 8.根据权利要求1 ‑2中任一权利要求所述的单克隆抗体在制备多发性骨髓瘤治疗药物 中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113683701 B 2人源化ALR人鼠嵌合单克隆抗体在 肝癌和多发性骨髓瘤治疗 中的应用 技术领域 [0001]本发明属于单克隆抗体技术领域， 尤其涉及一种人源化ALR人鼠嵌合单克隆抗体 在肝癌和多发性骨髓瘤治疗中的应用。 背景技术 [0002]肝再生增强因子(Augmenter  of Liver Regenerat ion， ALR)是一种支持肝再生蛋 白质， 与酵母Erv蛋白质家族高度同源， Erv 对于酵母的呼吸和营养生长 至关重要。 [0003]人类ALR(hALR)有三个亚型23kD、 21kD和15kDALR。 现有的研 究主要集中在23kD和 15kDALR上。 23kDALR主要定位于细胞线粒体， 参与氧化磷酸化等能量代谢过程， 是细胞存活 所必须的； 15KDALR主要分泌到细胞外， 与细胞生长、 增殖相关。 研究发现， 15KDALR在正常细 胞中表达少， 但是在肿瘤 细胞中高表达。 [0004]ALR与肝癌的发生、 发展存在一定关系。 例如， 研究发现， ALR能够刺激肝癌细胞株 增殖， 并呈剂量依懒性； 将AL R表达质粒转入肝癌细胞中， 发现A LR能明显促进肝癌细胞增殖 和增强其抗损伤的能力。 发明人在前期的工作也已经证实肝癌细胞自身能分泌hALR， 并且 肝癌细胞膜上hAL R受体表达明显高于原代 肝细胞， 说明hAL R可能通过自分泌循环 参与了肝 癌的发生、 发展。 那么基于 之前的研究， 探究15kDALR的人源化A LR人鼠嵌合单克隆抗体是否 能够阻断肝癌的发生、 发展， 可以为 肝癌的治疗提供新的研究思路。 [0005]除了肝癌外， 多发性骨髓瘤(multiple  myeloma,MM)也是一种来源于浆细胞的血 液系统恶性肿 瘤， 多见于60 ‑70岁老年人， 患病的存活期一般为3 ‑5年， 发病机制尚不清楚。 探究人源化A LR人鼠嵌合单克隆抗体在多发性骨髓瘤发生、 发展中的作用和作用机制， 能够 为多发性骨髓瘤的治疗提供新的参 考靶点和实验依据。 发明内容 [0006]本发明的目的在于提供一种人源化ALR人鼠嵌合单克隆抗体在肝癌和多发性骨髓 瘤治疗中的应用， 以至少解决上述 技术问题之一。 [0007]基于以上目的， 本发明提供一种人源化ALR人鼠嵌合单克隆抗体， 重链可变区包括 三个CDRs区域， 氨基酸序列分别为SEQ  ID NO:3、 SEQ  ID NO:4和SEQ  ID NO:5。 轻链可变区 包括三个CDRs区域， 氨基酸序列分别为SEQ  ID NO:6、 SEQ ID NO:7和SEQ  ID NO:8。 [0008]优选地， 重链的氨基酸序列为SEQ  ID NO:1； 轻链的氨基酸序列为SEQ  ID NO:2。 [0009]本发明还提供了一种核酸， 编码人源化ALR人鼠嵌合单 克隆抗体的氨基酸序列。 [0010]本发明还提供一种载体， 包括上述核酸。 [0011]本发明还提供一种宿主细胞， 包括上述载体。 [0012]本发明还提供一种组合物， 包括(1)上述人源化ALR人鼠嵌合单克隆抗体； 或(2)上 述核酸； 或(3)上述载体； 或(4)上述宿主细胞。 [0013]本发明还提供了上述人源化ALR人鼠嵌合单克隆抗体在制备肝癌治疗药物中的应说　明　书 1/20 页 3 CN 113683701 B 3