(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202110959914.0 (22)申请日 2021.08.20 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113713026 A (43)申请公布日 2021.11.30 (73)专利权人 上海市第七人民医院 （上海中 医 药大学附属第七人民医院） 地址 200137 上海市浦东 新区高桥大同路 358号 (72)发明人 朱建勇　李媛　张春燕　聂依文　 张瑞峰　夏伟　叶颖　俞雷　罗兰　 翟晓翔　 (74)专利代理 机构 上海光华专利事务所(普通 合伙) 31219 专利代理师 许亦琳　余明伟(51)Int.Cl. A61K 36/83(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/04(2006.01) A61K 31/353(2006.01) A61K 31/22(2006.01) A61K 31/352(2006.01) A61K 31/7048(2006.01) A61K 133/00(2006.01) (56)对比文件 CN 102697 768 A,2012.10.0 3 程晓叶等.芫花与黄 芫花特征图谱以及主 要 化学成分含量的比较 研究. 《药物分析杂志》 .2018,第38卷(第02期),241-25 0. 审查员 张溪 (54)发明名称 一种黄芫花抗肿瘤提取物及其制备方法和 用途 (57)摘要 本发明属于抗肿瘤医药技术领域， 公开了一 种黄芫花萃取物、 包含该萃取物的抗肿瘤药物及 制备方法和应用。 所述黄芫花萃取物的制备方法 为： 将黄芫花用小分子醇提取， 除去醇液， 所得剩 余部分用石油醚萃取， 除去石油醚萃取液， 所得 剩余部分用乙酸乙酯提取， 将乙酸乙酯提取液浓 缩， 干燥， 得到所述黄芫花提取物的乙酸乙酯萃 取物。 该萃取物通过抑制肿瘤细胞周期(G0/G1期 或者S期)、 细胞增殖而发挥抑制肿瘤细胞活性的 作用， 从而促进肿瘤细胞凋亡， 表现出非常好的 抗增殖促凋亡活性， 应用于抗肿瘤领域具有良好 的产业化前景。 权利要求书1页 说明书11页 附图7页 CN 113713026 B 2022.08.16 CN 113713026 B 1.一种黄芫花抗黑色素瘤提取物， 其特征在于， 包括下述重量份的成分： 异槲皮苷5 ‑15 份、 圣草酚1 ‑5份、 木犀草素40 ‑65份、 芹菜素0.2 ‑2份、 金黄酮1 ‑3份、 吡美肽A0.1 ‑1份、 6a, 7a‑环氧基‑5b‑羟基‑12‑脱氧佛波醇 ‑13‑癸酸酯0.1 ‑0.5份； 所述黄芫花抗黑色素瘤提取物的制备 方法包括： (1)取黄芫花， 采用小分子醇渗 漉提取， 获得黄 芫花小分子醇提取物； (2)除去小分子醇； (3)然后加石油醚萃取； (4)除去石油醚萃取 液； (5)向除去石油醚萃取液的剩余溶液中加入乙酸乙酯溶液进行萃取， 获得黄芫花小分 子醇提取物乙酸乙酯萃取部位， 即所述黄 芫花抗黑色素瘤提取物。 2.如权利要求1所述的黄芫花抗黑色素瘤提取物， 其特征在于， 包括下述重量份的成 分： 异槲皮苷10‑13、 圣草酚2 ‑3份、 木犀草素50 ‑60份、 芹菜素0.8 ‑1.2份、 金黄酮1.5 ‑2份、 吡 美肽A 0.40‑0.65份、 6a,7a ‑环氧基‑5b‑羟基‑12‑脱氧佛波醇 ‑13‑癸酸酯0.2 ‑0.4份。 3.一种如权利要求1所述的黄芫花抗黑色素瘤提取物的制备方法， 其特征在于， 所述方 法具体包括： (1)取中药材黄芫花， 采用小分子醇渗漉提取， 重复进行几次， 合并重复获得的小分子 醇渗漉提取液， 即黄芫花小分子醇提取物； (2)低温浓 缩黄芫花小分子醇提取物， 除去 小分子醇， 所 得浸膏加水制备成混悬 液； (3)然后加石油醚萃取； (4)除去石油醚萃取 液； (5)向除去石油醚萃取液的剩余溶液中加入乙酸乙酯溶液进行萃取， 分离获得乙酸乙 酯萃取液； 重复操作， 合并乙酸乙酯萃 取液， 浓缩得黄芫花小分子 醇提取物乙酸乙酯萃取部 位浸膏， 即所述黄 芫花抗黑色素瘤提取物。 4.如权利要求3所述的黄芫花抗黑色素瘤提取物的制备方法， 其特征在于， 所述小分子 醇选自甲醇、 乙醇、 丙醇、 乙二醇、 1,2 ‑丙二醇、 1,4 ‑丁二醇、 1,6 ‑己二醇、 新戊二醇、 二缩二 乙二醇、 一缩二丙二醇、 三羟甲基丙烷、 丙三醇和季戊四醇中的至少一种。 5.如权利要求1或2所述的黄 芫花抗黑色素瘤提取物在制备抗 黑色素瘤药物中的应用。 6.如权利要求5所述的应用， 其特征在于， 所述抗黑色素瘤是指预防和/或治疗黑色素 瘤； 所述治疗黑色素瘤是指抑制黑色素瘤的增殖、 生长、 迁移、 浸润， 促进黑色素瘤的凋亡。 7.一种药物组合物， 其特征在于， 所述药物组合物包括如权利要求1或2所述的黄芫花 抗黑色素瘤提取物以及药 学上可接受的载体、 介质。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113713026 B 2一种黄芫花 抗肿瘤提取物及其制备方 法和用途 技术领域 [0001]本发明属于抗肿瘤医药技术领域， 涉及一种黄芫花抗肿瘤提取物及其制备方法和 在制备抗肿瘤药物中的应用。 背景技术 [0002]全球每年大约有2～3百万例皮肤癌被确诊， 其中黑色素瘤是皮肤癌中常见的一种 恶性肿瘤， 占所有恶性肿 瘤的1％～3％。 黑色素瘤(melanoma)是起源于神经嵴黑素细胞的 上皮恶性肿瘤， 即恶性变化的色素斑痣。 近年来， 黑色素瘤发病年龄呈年轻化趋势， 在世界 范围内的发病率与死亡率呈明显增加趋势， 以6％～7％的增长速度逐年递增， 为发病率增 长最快的恶性肿 瘤之一。 全球每年新增黑色素瘤患者23.2万人， 其中新增死亡人数5.5万， 是皮肤癌中病死率最高的肿瘤。 中 国黑色素瘤诊治指南(2015版)中指出中 国的黑色素瘤发 病人群， 每年新增2万余人， 近年来也呈现递增趋势。 黑色素瘤已成为严重危害我国人民健 康的疾病之一。 [0003]目前黑色素瘤的治疗除了传统的手术治疗、 放化疗外， 还包括靶向治疗和免疫治 疗， 后两者已经成为临床研究的热点。 其中靶向治疗的临床应用如靶向黑色素瘤中高突变 基因的药物BRAF抑制剂(如vemurafenib)及靶向MEK1/2的抑制剂trametinib (GSK1120212)， 效果虽然显著， 但大多数患者很快会出现耐药。 而免疫治疗如抗CTLA ‑4抗体 ipilimumab和抗PD ‑1抗体nivolumab等， 仅在部分患者中产生满意的疗效。 虽然新的靶向治 疗和免疫 治疗提供了更高的患者反应率， 但患者的长期存活率 仍然很低。 [0004]因此迫切需要加强治疗黑色素瘤相关方面的研究， 在了解恶性黑色素瘤发展过程 中潜在的相关分子机制 基础上， 探索治疗黑色素瘤的新方法， 开发与研究合适的药物进行 治疗， 对抗 黑色素瘤的治疗具有重要意 义。 发明内容 [0005]为克服现有技术的上述缺陷， 本发明提供了一种黄芫花抗肿瘤 提取物及其制备方 法和应用。 [0006]本发明的目的可以通过以下技 术方案来实现： [0007]本发明一方面是提供一种黄芫花抗肿瘤提取物， 包括下述重量份的成分： 异槲皮 苷5‑15份、 圣草酚1 ‑5份、 木犀草素40 ‑65份、 芹菜素0.2 ‑2份、 金黄酮 1‑3份、 吡美肽A  0.1‑1 份、 6a,7a ‑环氧基‑5b‑羟基‑12‑脱氧佛波醇 ‑13‑癸酸酯0.1 ‑0.5份。 [0008]在一优选实施方式中， 所述的黄芫花抗肿瘤提取物包括下述重量份的成分： 异槲 皮苷11.1份、 圣草酚2.8份、 木犀草素54.4份、 芹菜素0.9 份、 金黄酮1.7份、 吡美肽A  0.53份、 6a,7a‑环氧基‑5b‑羟基‑12‑脱氧佛波醇 ‑13‑癸酸酯0.26份。 [0009]本发明一方面是提供一种黄 芫花抗肿瘤提取物的制备 方法， 所述方法包括： [0010](1)取黄芫花， 采用小分子醇渗 漉提取， 获得黄 芫花小分子醇提取物； [0011](2)除去小分子醇说　明　书 1/11 页 3 CN 113713026 B 3