(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202110879893.1 (22)申请日 2021.08.02 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113730332 A (43)申请公布日 2021.12.0 3 (73)专利权人 深圳市众循精准医学研究院 地址 518000 广东省深圳市罗湖区友谊路 47号罗湖区人民医院医技楼5楼 专利权人 苏州大学 (72)发明人 吴松　刘庄　李广志　邓达师　 (74)专利代理 机构 深圳市君胜知识产权代理事 务所(普通 合伙) 44268 专利代理师 徐凯凯 (51)Int.Cl. A61K 9/00(2006.01) A61K 47/10(2006.01)A61K 47/18(2006.01) A61K 47/02(2006.01) A61K 47/36(2006.01) A61P 13/10(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (56)对比文件 CN 110496228 A,2019.1 1.26 CN 110585130 A,2019.12.20 CN 111848832 A,2020.10.3 0 CN 111848830 A,2020.10.3 0 CN 111840566 A,2020.10.3 0 CN 111848835 A,2020.10.3 0 CN 106148315 A,2016.1 1.23 Ismail Dogan Gunbas.Semi-IPN Chitosan/PEG Microspheres and Fi lms for Biomedical. 《I& EC researc h》 .2012, 审查员 刘白璐 (54)发明名称 一种靶向肿瘤表面胶原的促进剂及其制备 方法与应用 (57)摘要 本发明公开的一种靶向肿瘤表面胶原的促 进剂及其制备方法与应用， 将聚乙二醇、 EDC和 NHS与二甲基亚砜进行混合得到溶液B， 然后将溶 液B滴加到 溶有氟化壳聚糖的溶液A1或溶有壳聚 糖的溶液A2， 对应得到PFCS或PCS， 向所述PCS滴 加全氟庚酸溶液改性得到PFCS， 向上述两种方案 得到的聚乙二醇改性的氟化壳聚糖中加入过量 的戊二醛避光搅拌后得到所述靶向肿瘤表面胶 原的促药物透上皮吸收促进剂， 通过该方法制备 得到的所述靶向肿瘤表面胶原的促进剂表面的 醛基可以为肿瘤部位的胶原氨基提供醛 ‑氨“席 夫碱”选择性粘附， 而改性的氟化壳聚糖结构可 以帮助调节膀胱上皮紧密连接， 从而打开上上皮 药物屏障， 进而增强治疗药物对膀胱肿瘤的渗 透， 可用于膀胱癌的灌注治 疗。 权利要求书1页 说明书9页 附图6页 CN 113730332 B 2022.12.30 CN 113730332 B 1.一种靶向肿瘤表面胶原的促进剂的制备 方法， 其特 征在于， 包括 步骤： 将全氟庚酸溶于二甲基亚砜中， 并依次加入EDC、 NHS进行避光活化得到活化的全氟庚 酸溶液； 将壳聚糖加入醋酸水溶液并进行搅拌溶解， 然后滴加氢氧化钠至pH为6.0 ‑6.8得到壳 聚糖溶液； 将所述全氟庚酸溶液滴加到所述壳聚糖溶液中， 避光反应得到所述氟化壳聚糖， 并将 所述氟化壳聚糖溶于水中配成溶 液A1； 称取聚乙二醇溶于二甲基亚砜中得到混合液， 向所述混合液加入N ‑(3‑(二甲氨基)丙 基)‑N‑乙基碳二亚胺盐酸盐和N ‑羟基琥珀酰亚胺并进行避光活化得到溶液B， 所述聚乙二 醇、 N‑(3‑(二甲氨基)丙基) ‑N‑乙基碳二亚胺盐酸盐和N ‑羟基琥珀酰亚胺的摩尔比为5： 6： 6； 将所述溶液B滴加到所述溶液A1中进行反应后经过透析得到聚乙二醇改性的氟化壳聚 糖， 所述溶 液B与所述溶 液A1的摩尔比为10:3； 向所述聚乙二醇改性的氟化壳聚糖加入戊二醛并进行避光搅拌， 然后经过透析得到所 述靶向肿瘤表面胶原的促进剂； 或者， 提供壳聚糖， 并将所述壳聚糖溶于醋酸水 溶液中得到溶 液A2； 称取聚乙二醇溶于二甲基亚砜中得到混合液， 向所述混合液加入N ‑(3‑(二甲氨基)丙 基)‑N‑乙基碳二亚胺盐酸盐和N ‑羟基琥珀酰亚胺并进行避光活化得到溶液B， 所述聚乙二 醇、 N‑(3‑(二甲氨基)丙基) ‑N‑乙基碳二亚胺盐酸盐和N ‑羟基琥珀酰亚胺的摩尔比为5： 6： 6； 将所述溶液B滴加到所述溶液A2中进行反应后经过透析得到聚乙二醇改性的壳聚糖， 所述溶液B与所述溶 液A2的摩尔比为10:3； 提供全氟庚酸溶液， 将所述全氟庚酸溶液滴加到所述聚乙二醇改性的壳聚糖中反应得 到聚乙二醇改性的氟化壳聚糖； 向所述聚乙二醇改性的氟化壳聚糖加入戊二醛并进行避光搅拌， 然后经过透析得到所 述靶向肿瘤表面胶原的促进剂； 其中， 所述避光活化的条件为室温避光， 且活化时间为3 0分钟； 所述避光搅拌的条件为在温度为 4℃下进行避光搅拌1小时； 所述聚乙二醇为单臂或多臂， 分子量10 00‑5000Da。 2.根据权利要求1所述的靶向肿瘤表面胶原的促进剂的制备方法， 其特征在于， 所述透 析过程选用截留分子量5 000Da的透析袋， 并在纯 水中进行透析48小时。 3.一种靶向肿瘤表面胶原的促进剂， 其特征在于， 所述靶向肿瘤表面胶原的促进剂由 权利要求1 ‑2的任一项的靶向肿瘤表面胶原的促进剂的制备 方法制得。 4.一种如权利要求3所述的靶向肿瘤表面胶原的促进剂用于制备治疗膀胱癌的药物载 体。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113730332 B 2一种靶向肿瘤表面胶原的促进剂及其制备方 法与应用 技术领域 [0001]本发明涉及 生物医学材料技术领域， 尤其涉及一种靶向肿瘤表面胶原的促进剂及 其制备方法与应用。 背景技术 [0002]膀胱癌是世界范围内最常见的泌尿系统恶性肿瘤之一， 其中大多数是非肌层浸润 性膀胱癌。 经尿道电切后进行膀胱灌注化疗药物或免疫刺激剂(如卡介苗等)是非肌层 浸润 性膀胱癌的一线治疗方法。 大约70％的患者在最初的膀胱内灌注治疗中失败， 并在5年内发 生肿瘤复发或进展， 并伴有相对较差的预后。 局部灌注药物治疗可有效清除残留肿瘤组织 的同时， 还可以大幅减小药物可能引起的系统性毒副作用。 虽然很临床药物已应用于膀胱 癌临床灌注治疗， 但由于其灌注液 的膀胱黏膜透过性和肿瘤组织渗透性较差， 故需要反复 多次、 大剂量灌注， 但最终其临床效果仍不令人满意， 平均缓解率低于30％， 即使是膀胱灌 注的首选灌注药物 卡介苗的缓解率也只有20％～ 47％， 而且可能引发如尿频、 血尿、 膀胱炎 及过敏反应等副作用使病人难以耐受。 [0003]由于膀胱上皮屏障的存在， 膀胱内药物对膀胱肿瘤病灶的穿透效率决定了膀胱灌 注治疗的效果。 目前， 膀胱灌注液主要为灌注药物的生理盐水或葡萄糖溶液， 临床还没有专 门用于改善灌注药物疗效的灌注药物载体的使用。 [0004]因此， 现有技 术还有待于改进和发展。 发明内容 [0005]鉴于上述现有技术的不足， 本发明的目的在于提供一种靶向肿瘤表面胶原的促进 剂及其制备方法与应用， 旨在解决现有技术中膀胱灌注药物在膀胱上表皮的穿透效率低、 肿瘤组织 渗透性差以及没有 灌注药物载体用于促进药物吸 收的问题。 [0006]本发明的技 术方案如下： [0007]一种靶向肿瘤表面胶原的促进剂的制备 方法， 包括 步骤： [0008]提供氟化壳聚糖， 并将所述氟化壳聚糖溶于水中配成溶 液A1； [0009]称取聚乙二醇溶于二甲基亚砜中得到混合液， 向所述混合液加入N ‑(3‑(二甲氨 基)丙基) ‑N‑乙基碳二亚胺盐酸盐和N ‑羟基琥珀酰 亚胺并进行避光活化得到溶 液B； [0010]将所述溶液B滴加到所述溶液A1中进行反应后经过透析得到聚乙二醇改性的氟化 壳聚糖； [0011]向所述聚乙二醇改性的氟化壳聚糖加入戊二醛并进行避光搅拌， 然后经过透析得 到所述靶向肿瘤表面胶原的促进剂； [0012]或者， [0013]提供壳聚糖， 并将所述壳聚糖溶于醋酸水 溶液中得到溶 液A2； [0014]称取聚乙二醇溶于二甲基亚砜中得到混合液， 向所述混合液加入N ‑(3‑(二甲氨 基)丙基) ‑N‑乙基碳二亚胺盐酸盐和N ‑羟基琥珀酰 亚胺并进行避光活化得到溶 液B；说　明　书 1/9 页 3 CN 113730332 B 3