(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202110885799.7 (22)申请日 2021.08.0 3 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113583979 A (43)申请公布日 2021.11.02 (73)专利权人 杭州荣谷生物科技有限公司 地址 310056 浙江省杭州市滨江区长河街 道滨安路68 8号4幢5层501室 (72)发明人 钱文斌　王世兵　叶倩　陈洁　 (74)专利代理 机构 上海九泽 律师事务所 313 37 专利代理师 蔡佳杰 (51)Int.Cl. C12N 7/01(2006.01) C12N 15/85(2006.01) C12N 15/13(2006.01) A61K 35/768(2015.01) A61K 39/395(2006.01) A61P 35/00(2006.01) C12R 1/93(2006.01) A61K 31/337(2006.01)(56)对比文件 CN 111214496 A,2020.0 6.02 CN 109096 395 A,2018.12.28 CN 110669138 A,2020.01.10 CN 1093123 09 A,2019.02.0 5 CN 110256565 A,2019.09.20 CN 112105646 A,2020.12.18 US 20191 19379 A1,2019.04.25 CN 10816 5536 A,2018.0 6.15 CN 112867507 A,2021.0 5.28 US 2022144943 A1,202 2.05.12 CN 110862455 A,2020.0 3.06 CN 105543182 A,2016.0 5.04 CN 105535993 A,2016.0 5.04 CN 106591361 A,2017.04.26 CN 111763660 A,2020.10.13 US 2020038453 A1,2020.02.0 6 CN 10827 7234 A,2018.07.13 (续) 审查员 留盛鹏 (54)发明名称 一种重组溶瘤痘苗病毒、 制备方法及其用途 (57)摘要 本发明公开了一种重组溶瘤痘苗病毒、 制备 方法及其用途， 所述重组溶瘤痘苗病毒可操作地 插入能够 表达CD47纳米抗体的外源基因， 所述外 源基因插入痘苗病毒TK基因中； 所述外源基因的 DNA序列如SEQ  ID NO.1所示； 所述外源基因的氨 基酸序列如SEQ  ID NO.2所示。 重组溶瘤痘苗病 毒在制备用于预防或治疗肿瘤或/和癌症的药物 中的用途。 所述肿瘤或/和癌症包括乳腺癌、 结肠 癌、 胰腺癌、 胃癌、 结肠腺癌。 本申请创造性地将 CD47纳米抗体基因插入溶瘤痘苗病毒， 使得溶瘤 痘苗病毒在肿瘤细胞中复制并裂解细胞， 杀死肿 瘤细胞的同时， 表达CD47纳米抗体， 促进巨噬细 胞对肿瘤细胞的吞噬作用， 从而提高了治疗效果。 [转续页] 权利要求书1页 说明书15页 序列表3页 附图9页 CN 113583979 B 2022.11.22 CN 113583979 B (56)对比文件 Cao Felicia 等.Engi neering Oncolytic Vaccinia Virus to redirect Macropha ges to Tumor Cel ls. 《Adv Cel l Gene Ther》 .2021,第4 卷(第2期), 邵荣光.基于单克隆抗体的肿瘤免疫 治疗. 《药学学报》 .2020,第5 5卷(第6期), 巩睿智 等.表达SIRPα-Fc的基因-溶瘤腺 病毒对胆管癌治 疗作用的实验研究. 《现代肿瘤 医学》 .2015,第23卷(第3期), Xu B 等.An o ncolytic virus expres sing a full-length antibody enhances antitumor innate immune respo nse to gl ioblastoma.《Nat Com mun》 .2021,第12卷(第1期), 王世兵 等.基 于痘苗病毒载体的恶性肿瘤 基因治疗研究进 展. 《中国细胞生物学 学报》 .2014,第3 6卷(第1期), 刘品一.基因溶瘤腺病毒SG6 35-SF对卵巢癌 的作用研究. 《中国优秀硕士学位 论文全文数据 库 （电子期刊） 医药卫 生科技辑》 .2016,(第1期), 席欧彦 等.抗CD47 单链抗体制备及抗原结 合活性分析. 《生物技 术》 .2017,第27 卷(第4期), Huang Yao 等.A SIRPα-Fc fusi on protein enhances the antitumor ef fect of oncolytic aden ovirus a gainst ovarian cancer. 《Mo l Oncol》 .2020,第14卷(第3期),2/2 页 2[接上页] CN 113583979 B1.一种重组溶瘤痘苗病毒， 其特征在于： 所述重组溶瘤痘苗病毒可操作地插入能够表 达CD47纳米抗体的外源基因； 所述外源基因的氨基酸序列如SEQ  IDNO.2所示。 2.根据权利要求1所述的一种重组溶瘤痘苗病 毒， 其特征在于： 所述外源基因插入痘苗 病毒TK基因中。 3.根据权利要求1所述的一种重组溶瘤痘苗病毒， 其特征在于： 所述外源基因的DNA序 列如SEQ ID NO.1所示。 4.根据权利要求1所述的一种重组溶瘤痘苗病毒， 其特征在于： 所述外源基因通过IRES 序列连接 。 5.根据权利要求4所述的一种重组溶瘤 痘苗病毒， 其特征在于： 所述IRES序列如SEQ  ID  NO.4所示。 6.一种药物 组合物， 其特征在于， 所述药物 组合物包括如权利要求1 ‑5中任一项所述的 重组溶瘤痘苗病毒、 药 学上可接受的载体和药物辅料。 7.根据权利要求6所述的一种药物组合物， 其特 征在于， 所述药物辅料为 紫杉醇。 8.根据权利要求1 ‑5中任一项所述的重组溶瘤痘苗病毒在制备用于治疗肿瘤或/和癌 症的药物中的用途。 9.根据权利要求6 ‑7中任一项所述的一种药物组合物在制备用于治疗肿瘤或/和癌症 的药物中的用途。 10.根据权利要求9所述的用途， 其特征在于： 所述肿瘤或/和癌症包括乳腺癌、 结肠癌、 胰腺癌、 胃癌、 结肠腺癌、 直肠癌、 肝癌。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113583979 B 3