(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202110895231.3 (22)申请日 2021.08.0 5 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113637089 A (43)申请公布日 2021.11.12 (73)专利权人 天津科技大 学 地址 300457 天津市滨 海新区经济技 术开 发区第十三大街9号 (72)发明人 刘安军　于娟　纪海玉　 (74)专利代理 机构 天津盛理知识产权代理有限 公司 12209 专利代理师 陈娟 (51)Int.Cl. C08B 37/00(2006.01) A61K 31/715(2006.01)A61P 35/00(2006.01) (56)对比文件 CN 105906735 A,2016.08.31 CN 105906734 A,2016.08.31 Jiankuan Li等.“Isolation and structural identificati on of a n ovel fructan from Radix Codo nopsis”. 《JOURNAL OF CARBOH YDRATE C HEMISTRY》 .2020,第16 3-174 页. 张霞等.“不同基源、 产地对党参总多糖中低 分子量果聚糖的影响 ”. 《中成药》 .2020,第45 -49 页. 审查员 封志强 (54)发明名称 一种醇水两溶性党参葡 果聚糖、 制备工艺及 抗肿瘤应用 (57)摘要 本发明涉及一种党参葡 果聚糖， 该多糖具有 醇水两溶特性。 制备方法为： 将党参粉末加入到 的蒸馏水中， 超声波辅助下热水浸提， 抽滤， 离 心， 取上清， 经真空旋转蒸发仪进行浓缩， 得到党 参浓缩液， 向得到的浓缩液中加入无水乙醇溶 液， 混匀后冰箱放置过 夜， 离心， 弃沉淀后再次旋 蒸去除乙醇， 再利用Sepha dex‑G25凝胶柱进行分 离， 收集无还原糖的主要多糖组分， 冻干后得到 低分子量党参葡果聚糖。 经小鼠体内抗肿瘤实验 得到其100mg/kg的灌胃剂量时对H22荷瘤小鼠抑 瘤率可达53.98％。 本发明高效利用了水溶醇沉 工艺中的醇溶废弃物， 对其中的醇水两溶性多糖 进行提取分离， 结果表明这部分葡果聚糖不仅结 构简单， 生物活性强， 而 且生产质量高。 权利要求书1页 说明书8页 附图4页 CN 113637089 B 2022.05.31 CN 113637089 B 1.一种党参葡果聚糖， 其特征在于： 该多糖具有醇水两溶特性， 多糖含量为92  .85± 3  .52％， 蛋白含量为2  .25±0 .06％， 糖醛酸含量为0  .28±0 .02％， 平均分子量为3  .24×   103 Da， 果糖/葡萄糖的摩尔比为2  .73:1 .00， 具有β ‑和α‑两种糖苷键构型， 由β ‑(2→1)‑ 果聚糖链接α ‑(1→3)‑葡聚糖为主链组成。 2.根据权利要求1所述的党参葡果聚糖的制备 方法， 其特 征在于： 步骤如下： (1)将党参根茎粉末加入到的蒸馏水中， 含量为0  .01g/ml～0  .05g/ml， 超声辅助热水 浸泡2‑3h， 抽滤， 离心取 上清， 经真空旋转蒸发仪40～6 0℃进行浓 缩， 得到党参浓 缩液； (2)向步骤(1)得到的浓缩液中， 加入无水乙醇溶液至体积 分数80％， 混匀后冰箱4℃ 放 置过夜， 离心， 弃沉淀后再次旋蒸去除乙醇， 再利用Sephadex ‑G25凝胶柱进行分离， 收集无 还原糖的多糖组分， 冻干后得到低分子量党参葡果聚糖。 3.根据权利要求2所述的党参葡果聚糖的制备方法， 其特征在于： 步骤(1)离心后的滤 渣经过2～4次重复提取， 与第一次提取的上清液混合再浓 缩。 4.一种权利要求1所述的党参葡果聚糖在制备抗肿瘤 细胞H22药物中的应用。 5.一种权利要求1所述的党参葡果聚糖在制备增强机体免疫能力药物中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113637089 B 2一种醇水两溶性党参葡果聚糖、 制备工艺及抗肿瘤应用 技术领域 [0001]本发明属于党参葡果聚糖活性研究领域， 涉及抗肿瘤活性的研究， 尤其是一种醇 水两溶性党参葡果聚糖制备工艺及抗肿瘤应用。 背景技术 [0002]党参是一种著名的药食同源多年生草本植物， 具有强大的生物活性， 包括增强免 疫、 健脾、 养肺， 由于成本较低， 可以考虑作为人参的可靠替代品。 党参多糖已被证实为其主 要有效活性成分， 并具有免疫调节、 抗病毒和抗癌活性， 应用前景广泛。 采用碱液、 超声波、 酶和微波等多种辅助条件已被广泛应用于提高不同来源多糖的提取得率， 从而有利于其工 业化生产和实际应用。 超声波辅助处理是目前应用最广泛的一种辅助方法， 具有能耗更低， 条件更温和的特点， 可在液体介质中产生声空化气泡， 加速多糖的溶解， 通过破坏细胞壁来 提高多糖提取率。 据报道， 与传统提取方法相比， 超声波辅助提取可明显提高多糖得率52 ‑ 129％。 据报道， 不同的提取方法会显著影响提取率、 结构特征和生物学特性。 传统的党参多 糖提取方法主要采用热水为提取溶剂， 用终体积分数为75～80％的乙醇进行沉淀， 但忽略 了75～80％乙醇中溶解的成分， 造成资源浪费。 发明内容 [0003]本发明的目的在于针对现有的水溶醇沉技术中所得多糖结构复杂， 水溶性差， 得 率和活性低等不 足， 提供一种党参葡 果聚糖及其制备方法， 所得低聚糖结构简单， 生物活性 强， 生产质量高。 [0004]本发明解决其 技术问题是采取以下技 术方案实现的： [0005]一种党参葡果聚糖， 该多糖具有醇水两溶特性， 多糖含量为92.85 ±3.52％， 蛋白 含量为2.25 ±0.06％， 糖醛酸含量为0.28 ±0.02％， 平均分子量约为3.24 ×103Da， 果糖/葡 萄糖的摩尔比为2.73:1.00， 具有β ‑和α‑两种糖苷键构型， 由β ‑(2→1)‑果聚糖链接α ‑(1→ 3)‑葡聚糖为主链组成。 [0006]该党参葡果聚糖的制备 方法， 步骤如下： [0007](1)将党参根茎粉末加入到的蒸馏水中， 含量为0.01g/ml～0.05g/ml， 超声辅助热 水浸泡2‑3h， 抽滤， 离心取 上清， 经真空旋转蒸发仪40～6 0℃进行浓 缩， 得到党参浓 缩液； [0008](2)向步骤(1)得到的浓缩液中， 加入无水乙醇溶液至体积分数80％， 混匀后冰箱4 ℃放置过夜， 离心， 弃沉淀后 再次旋蒸去除乙醇， 再利用Sephadex ‑G25凝胶柱进行分离， 收 集无还原糖的多糖组分， 冻干后得到低分子量党参葡果聚糖。 [0009]进一步的， 步骤(1)离心后的滤渣经过2～4次重复提取， 与第一次提取的上清液混 合再浓缩。 [0010]本发明进一 步保护党参葡果聚糖在制备抗肿瘤 细胞H22药物中的应用。 [0011]本发明进一步保护党参葡果聚糖在制备肿瘤小鼠增强机体免疫能力药物中的应 用。 包括正常人的肿瘤预防以及肿瘤患者 术后的康复， 预防肿瘤复发等。说　明　书 1/8 页 3 CN 113637089 B 3