行业文档 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T2497.25—2010 进出口危险化学品安全试验方法 第25部分：体液免疫功能试验 Test method of import and export dangerous chemicals- Part 25:Determination of humoral immune function 2010-03-02发布 2010-09-16实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T2497.25—2010 前言 SN/T2497《进出口危险化学品安全试验方法》系列标准共分为29部分： 第1部分：体内哺乳动物肝细胞程序外DNA合成（UDS)试验； 第2部分：空斑形成细胞（PFC)试验； 第3部分：大型涵繁殖试验； 第4部分：酿酒酵母有丝分裂重组试验； 第5部分：睾丸细胞UDS试验； 第6部分：哺乳类动物细胞姐妹染色单体互换体外试验； 第7部分：小鼠耳肿胀试验； 第8部分：胆窝淋巴结试验； 第9部分：血清溶血素测定试验； 第10部分：T淋巴细胞增殖功能测定试验； 第11部分：种系突变试验； 第12部分：单细胞凝胶电泳分析试验； 第13部分：荧光原位杂交试验； 第14部分：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳试验； 第15部分：PCR-SSCP实验； 第16部分：Western-Blot实验； 第17部分：哺乳动物行为毒理学试验； 第18部分：DNA加合物的检测方法； 第19部分：NorthernBlot实验； 第20部分：Bradford法测定蛋白质含量； 第21部分：琼脂糖凝胶电泳试验； 第22部分：DNA的Tm值测定方法； 第23部分：细胞器的分离实验方法； 第24部分：细胞免疫功能体外检测方法； 第25部分：体液免疫功能试验； 第26部分：巨噬细胞功能试验； 第27部分：流式细胞术检测凋亡； 第28部分：穿梭质粒在突变检验中的应用； 第29部分：生化需氧量（BOD)测定。 本部分为SN/T2497系列标准的第25部分。 本部分修改采用《毒理学实验方法与技术》中的免疫毒理学研究方法，其有关技术内容与上述方法 完全一致，在标准文本格式上按GB/T1.1做了编辑性修改。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分负责起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局、中华人民共和国湖南出人境检验检 疫局。 本部分主要起草人：吕刚、王利兵、冯智勘、李学洋、熊中强、赵好力宝。 本部分系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 I SN/T2497.25—2010 进出口危险化学品安全试验方法 第25部分：体液免疫功能试验 1范围 SN/T2497的本部分规定了进出口危险化学品安全试验中体液免疫功能试验的试验原理、试验方 法和试验结果。 本部分适用于检测进出口危险化学品的免疫毒性的体液免疫功能试验。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过SN/T2497的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文 件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成 协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本 部分。 GB14924.1实验动物配合饲料通用质量标准 GB14925实验动物环境及设施 3术语和定义 下列术语和定义适用于本部分。 3. 1 超敏反应hypersensitivity 是指已致敏的机体再次接触相同变应原时，所引起的自身组织损伤和/或生理功能紊乱。超敏反应 是异常的或病理性的免疫应答。 3. 2 速发型超敏反应 anaphylaxis 依照超敏反应的发生机制，可将其分为I、Ⅱ、Ⅲ、IV型，其中的I型超敏反应又称为变态反应。 3.3 真allergen 变应原 引起超敏反应的抗原称为变应原。 4试验原理 在I型超敏反应中，变应原首次进人机体，刺激浆细胞产生IgE，IgE的Fc段与肥大细胞或嗜碱性 致敏机体时，即可与吸附在这些细胞表面的IgE结合，引起一系列反应，使这些细胞释放组胺等生物活 性介质，引起工型过敏反应的发作，即发敏阶段。组胺是一个主要的生物活性介质，它的迅速释放，能扩 张小血管和增加毛细血管通透性、刺激平滑肌收缩、促进黏膜腺体分泌增加；导致血压下降、呼吸困难、 腹痛，甚至引起过敏性休克，导致死亡。 5试验方法 5.1 试验动物 成年的健康豚鼠。试验动物饲养条件应符合GB14924.1和GB14925的相关规定。 1 SN/T2497.25—2010 5. 2 试剂耗材 新鲜蛋清：取新鲜鸡蛋的蛋清，作1：10稀释， 5. 3 3试验步骤 5.3.1致敏注射 在试验开始前2周，给豚鼠皮下注射1mL稀释的蛋清。 5.3.2发敏注射 固定好豚鼠，找到心尖搏动处，用碘酒、酒精依次消毒后，给豚鼠心内注射1mL稀释的蛋清。放开 豚鼠，观察反应情况。 9 试验结果 在发敏注射后数分钟，豚鼠会出现一系列症状，表现为兴奋不安、躁动、鼻翼翁动、抓鼻，呼吸急促、 毛发笃立、四肢痉挛、跳跃，甚至死亡。 2 SN/T 2497.25—2010 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 进出口危险化学品安全试验方法 第25部分：体液免疫功能试验 SN/T2497.25—2010 * 中国标准出版社出版 北京复兴门外三里河北街16号 邮政编码：100045 网址www.spc.net.cn 电话：68523946 68517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 * 开本880×1230 1/16 印张0.5 字数5千字 2010年5月第一版 2010年5月第一次印刷 印数1-1600 * SN/T2497.25-2010 书号：155066·2-20931 定价14.00元 SN/T 2497.25—2010 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 进出口危险化学品安全试验方法 第25部分：体液免疫功能试验 SN/T2497.25—2010 * 中国标准出版社出版 北京复兴门外三里河北街16号 邮政编码：100045 网址www.spc.net.cn 电话：68523946 68517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 * 开本880×1230 1/16 印张0.5 字数5千字 2010年5月第一版 2010年5月第一次印刷 印数1-1600 * SN/T2497.25-2010 书号：155066·2-20931 定价14.00元