中华人民共和国国家标准 GB1886.231—2016 食品安全国家标准 食品添加剂 乳酸链球菌素 2016-08-31发布 2017-01-01实施 中华人民共和国 国家卫生和计划生育委员会发布GB1886.231—2016 1 食品安全国家标准 食品添加剂 乳酸链球菌素 1 范围 本标准适用于经乳酸乳球菌(Lactococcuslactissubsplactis)发酵后提取而制得的食品添加剂乳 酸链球菌素。 2 分子式、结构式和相对分子质量 2.1 分子式 C143H230O37N42S7(NisinA) C141H228O38N41S7(NisinZ) 2.2 结构式 NisnA:第27位氨基酸为组氨酸(His);NisnZ:第27位氨基酸为天冬酰胺(Asn) 2.3 相对分子质量 NisinA:3354.35(按2013年国际相对原子质量) NisinZ:3330.31(按2013年国际相对原子质量) 3 技术要求 3.1 感官要求 感官要求应符合表1的规定。GB1886.231—2016 2 表1 感官要求 项目 要求 检验方法 色泽 浅棕色至乳白色 状态 粉末将适量试样均匀置于白瓷盘内,在自然光线下观察其色泽 和状态 3.2 理化指标 理化指标应符合表2的规定。 表2 理化指标 项 目 指 标 检验方法 效价/(IU/mg) ≥ 900 附录A中的A.3 干燥减量,w/% ≤ 3.0 GB5009.3 氯化钠,w/% ≥ 50.0 GB/T5009.42 铅(Pb)/(mg/kg) ≤ 1.0 GB5009.75 注:商品化的乳酸链球菌素产品应以符合本标准的乳酸链球菌素为原料,可添加氯化钠、乳固体等辅料而制成, 其效价符合声称。 3.3 微生物指标 微生物指标应符合表3的规定。 表3 微生物指标 项 目 指 标 检验方法 菌落总数/(CFU/g) ≤ 10 GB4789.2 大肠菌群/(MPN/g) < 3.0 GB4789.3 大肠埃希氏菌/(MPN/g) < 3.0 GB4789.38 沙门氏菌 不得检出 GB4789.4GB1886.231—2016 3 附 录 A 检验方法 A.1 一般规定 本标准除另有规定外,所用试剂的纯度应为分析纯,所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂 及制品,应按GB/T601、GB/T602、GB/T603的规定制备,试验用水应符合GB/T6682中三级水的规 定。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时,均指水溶液。 A.2 鉴别试验 A.2.1 试剂和材料 A.2.1.1 盐酸溶液:0.02mol/L。 A.2.1.2 氢氧化钠溶液:5mol/L。 A.2.1.3 脱脂牛奶:脂肪含量<1%。 A.2.1.4 石蕊牛奶培养基。 A.2.1.5 检测菌:乳酸乳球菌(ATCC11454,NCIMB8586)。 A.2.2 分析步骤 A.2.2.1 试样储备液制备 取1g试样,溶于1L盐酸溶液中,溶液效价约为1000IU/mL。 A.2.2.2 对酸溶液的稳定性试验 用盐酸溶液将试样储备液稀释至约50IU/mL,制成试样溶液。将该试样溶液煮沸5min,按效价 测定方法测煮沸过的试样溶液中Nisin效价。计算煮沸过的试样中Nisin的效价,计算结果在其效价值 的(100%±5%)内,表明无显著活性损失。 A.2.2.3 对碱溶液的稳定性试验 用盐酸溶液将试样储备液稀释至约50IU/mL,制成试样溶液。将该试样溶液煮沸5min,用氢氧 化钠溶液调pH至11.0将溶液加热到65℃保持30min,冷却。然后滴加盐酸调pH至2.0,用效价测定 方法测定最终溶液中Nisin的效价。在按照上述操作处理后会出现抑菌活性的几乎完全损失。 A.2.2.4 不同抑菌物质中Nisin的鉴别 A.2.2.4.1 乳酸乳球菌的培养:乳酸乳球菌(工作菌株)(ATCC11454,NCIMB8586)在无菌脱脂牛奶中 培养,30℃培养18h。 A.2.2.4.2 准备1个或多个装有100mL石蕊牛奶培养基的长颈烧瓶,在121℃灭菌15min,将0.1g 试样加入该无菌的石蕊牛奶培养基中混匀,在室温下静置2h后加入0.1mL检测菌,30℃下培养 24h。 A.2.2.4.3 检测菌(乳酸乳球菌)可在该效价的试样(约1000IU/mL)中生长,但不能在相似浓度的其 他抑菌物质中生长。