ICS 65.150 B 50 DB36 江 西 省 地 方 标 准 DB 36/ T 967—2017 河川沙塘鳢 odontobutis potamophila 2017 - 10 - 23 发布 江西省质量技术监督局 2018 - 01 - 01 实施 发 布 DB36/T 967—2017 目 前 次 言 ............................................................................. II 1 范围 ............................................................................... 1 2 规范性引用文件 ..................................................................... 1 3 学名和分类地位 ..................................................................... 1 4 主要形态结构特征 ................................................................... 1 5 生长与繁殖 ......................................................................... 2 6 遗传学特性 ......................................................................... 3 7 检测方法 ........................................................................... 4 附录 A（规范性附录） 试剂配制 ........................................................ 5 I DB36/T 967—2017 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 《标准化工作导则 第 1 部分：标准的结构和编写规则》给出的规则起 草。 本标准由江西省农业厅提出并归口。 本标准起草单位：江西省水产科学研究所、上饶县欣叶农业有限公司起草。 本标准主要起草人：王海华、徐先栋、吴斌、朱述淦、余连渭、康升云、肖林华、彭国萍、熊艳、 习宏斌、张斌华。 II DB36/T 967—2017 河川沙塘鳢 1 范围 本标准规定了河川沙塘鳢（Odontobutis potamophila）的学名与分类地位、形态特征、生长繁殖、 细胞遗传学和生化遗传学特性以及检测方法。 本标准适用于河川沙塘鳢种质的检测和鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 18654.3 养殖鱼类种质检验 第3部分：性状测定 GB/T 18654.12 养殖鱼类种质检验 第12部分：染色体组型分析 GB/T 18654.13 养殖鱼类种质检验 第13部分：同工酶电泳分析 3 3.1 学名和分类地位 学名 河川沙塘鳢( Odontobutis potamophila)。 3.2 分类地位 属鲈形目( Perciformes)，沙塘鳢科（Odontobutidae），沙塘鳢属( Odontobutis) 。 4 主要形态结构特征 4.1 外部形态特征 4.2 外部形态 河川沙塘鳢鱼体粗壮，前部圆筒形，后部侧扁。头宽大平扁，宽大于高。吻宽短，吻大于眼径。眼 小，上侧位，稍突出；眼间隔宽而凹入，大于眼径。鼻孔2个，前鼻孔具一短管，后鼻孔小，圆形。口 大，端位，斜裂，下颌突出，上颌骨后延伸达 眼中部下方或稍前。舌大，游离，前端圆形。牙细小尖 锐，两颌各有多行，排列呈带状。犁骨无齿，有咽齿。体色可随环境的变化而改变，呈褐色至黑褐色， 体背侧有黑色大斑3块。各鳍均有明暗交替的带状纹。河川沙塘鳢外形见图1。 1 DB36/T 967—2017 图1 4.3 河川沙塘鳢外形图 可数性状 4.3.1 鳍式 鳍式：D.Ⅵ～Ⅷ，Ⅰ－7～10（以Ⅶ，Ⅰ－9为主）；A.Ⅰ－6～9（以Ⅰ－7为主）；P.14～17（以 15为主）；V.Ⅰ－5。 4.3.2 鳞式 纵列鳞34～41（以36～37为主）；横列鳞14～17（以15～16为主）；背鳍前鳞24～31（以27～28 为主）；体侧感觉乳突线鳞28~29。 4.3.3 第一鳃弓鳃耙数 第一鳃弓鳃耙数9～11。 4.3.4 脊椎骨数 脊椎骨数28～29。 4.4 可量性状 经过对100尾河川沙塘鳢可量性状测量，得出可量性状表，见表1。 表1 河川沙塘鳢可量性状 可量性状 项目 体长/尾柄 体长/体高 体长/头长 头长/眼径 头长/吻长 100 100 5.89±0.7 3.11±0.4 9 4 3.98～ 2.35～ 7.37 4.06 尾柄长/尾柄高 长 样本数（尾） 100 100 100 3.12±0.62 4.97±0.47 3.69±0.5 均值±标准差 3 变幅 2.99～4.4 2.64～4.07 100 1.59±0.23 4.58～6.89 1.41～1.97 2 DB36/T 967—2017 5 生长与繁殖 5.1 生长 不同年龄组的鱼体长和体重的实测值见表 2。 表2 5.2 河川沙塘鳢各年龄组的体长和体重实测值 + + 年龄，龄 0 Ⅰ + Ⅱ 样本数，尾 63 28 9 体长均值（cm）±标准差 7.17±1.04 9.86±1.58 11.78±1.47 体长变幅（cm） 5.64～8.52 8.46～10.75 10.54～12.69 体重均值（g）±标准差 8.26±1.24 21.48±4.55 36.64±4.98 体重变幅（g） 7.48～9.65 11.61～23.97 25.63～39.44 繁殖 5.2.1 性成熟年龄 雌鱼、雄鱼的 I 冬龄鱼均已性成熟。 5.2.2 产卵特性 繁殖季节一般为3月至6月，盛产期为4月至5月，分批产卵，卵粘性。 5.2.3 怀卵量 经对I～III龄成熟雌鱼性腺测量得出河川沙塘鳢绝对怀卵量平均为4216粒；相对怀卵量平均为82 粒/g。 6 遗传学特性 6.1 河川沙塘鳢染色体核型 6.1.1 染色体数 体细胞染色体2倍数，2n=44。 6.1.2 染色体核型图 染色体组全部由端部着丝粒染色体构成，见图2。 3 DB36/T 967—2017 图 2 河川沙塘鳢染色体组型 6.2 河川沙塘鳢同工酶检测 6.2.1 乳酸脱氢酶酶谱表型 乳酸脱氢酶（LDH）在沙塘鳢各组织中含量较为丰富，酶带比较多，共检测到5条酶带（图3）。酶 带分布具有明显的组织差异性：脑组织中条带数量及含量最为丰富，共检出5条清晰的酶带；鳃组织次 之，共检出4条酶带；肝脏中检出3条带，颜色较淡；心、肾组织中检出两条带；脾脏和肌肉组织中只检 出1条酶带。 图3 河川沙塘鳢不同组织乳酸脱氢酶电泳图谱及酶谱示意图 注：G：鳃；B：脑；L：肝；S：脾；H：心；K：肾；M ：肌肉。 7 7.1 检测方法 形态特征的测定 按GB/T 18654.3的规定执行。 7.2 细胞遗传学特性 按GB/T 18654.12的规定执行。 7.3 生化遗传学特性测定 按GB/T 18654.13的规定执行。 4 DB36/T 967—2017 AA 附 录 A （规范性附录） 试剂配制 A.1 生理盐水 氯化钠 8.5g，ddH2 O 1000ml，121 ℃高温高压灭菌20min备用。 A.2 秋水仙素 称取20mg秋水仙素，加入0.85%生理盐水溶液20ml，待完全溶解后，经121℃高温高压灭菌15min， 避光保存于4℃冰箱备用。 A.3 植物血凝素 称取20mg植物凝集素，加入0.85%生理盐水溶液20ml，待完全溶解后，保存于4℃冰箱备用。 A.4 卡诺氏固定液(Carnoy's Fluid) 配方：纯酒精3份+冰醋酸1份。 A.5 磷酸缓冲液 pH7.0 0.1mol/L PBS KH2 PO4 13.6g K2 HPO4 22.832g NaCl 8.5g 加ddH2 O至 1000ml 经121℃高温高压灭菌20min，保存于4 ℃冰箱备用。 A.6 0.075mol/L氯化钾低渗液 氯化钾0.559g，蒸馏水100ml。 A.7 姬姆萨染液 Giemsa原液1ml 1/15 mol/L磷酸缓冲液（pH6.8或7.4）10ml。 _________________________________ 5