(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202111365634.3 (22)申请日 2021.11.18 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114516917 A (43)申请公布日 2022.05.20 (66)本国优先权数据 202011307482.7 2020.1 1.20 CN (73)专利权人 广东东阳光药业有限公司 地址 523808 广东省东莞 市松山湖园区工 业北路1号 (72)发明人 任志衡　董军纪　何转娣　王克柱　 卢杰联　林树珊　刘亮　李想　 张阔　蒋燕　李晓平　陈小锋　 李文佳　(51)Int.Cl. C07K 16/28(2006.01) C12N 15/13(2006.01) A61K 39/395(2006.01) A61P 29/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 25/00(2006.01) A61P 15/00(2006.01) A61P 25/02(2006.01) A61P 13/08(2006.01) A61P 19/08(2006.01) A61P 19/00(2006.01) 审查员 刘新蕾 (54)发明名称 人源化抗TrkA的抗体及其应用 (57)摘要 本发明提出了一种能够特异性识别TrkA的 人源化抗体或其抗原结合片段及其用途。 该抗体 具有SEQ ID NO： 2‑8任一项所示氨 基酸序列的重 链可变区， SEQ  ID NO： 10～13任一项所示氨 基酸 序列的轻链可变区。 根据本发明实施例的上述抗 体能够特异性的靶向结合TrkA受体， 阻断NGF和 TrkA结合。 权利要求书2页 说明书23页 序列表36页 附图6页 CN 114516917 B 2022.11.18 CN 114516917 B 1.一种能够特异性识别TrkA的人源化抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述抗体 或其抗原结合片段 具有选自下述的重链可变区和轻链可变区： (a)由SEQ  ID NO： 2所示氨基酸序列的重链可变区和由SEQ  ID NO： 10所示氨基酸序列 的轻链可变区。 2.根据权利要求1所述的人源化抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述抗体或其抗 原结合片段 特异性识别TrkA的胞外区。 3.根据权利要求1所述的人源化抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述抗体含有重 链恒定区和轻链恒定区的至少之一， 所述重链恒定区和轻链恒定区均来自于人源IgG抗体 或其突变体。 4.根据权利要求1所述的人源化抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述抗体的轻链 恒定区来自于人源的Kap pa轻链恒定区； 重链恒定区来自于人源IgG4的重链恒定区。 5.根据权利要求4所述的人源化抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述抗体的Fc区 域与人源IgG4野生型的Fc相比具有S10P， F16A， L17A， R191K突变以及229K缺失突变， 其中人 源IgG4野生型的Fc具有SEQ  ID NO:16所示氨基酸序列。 6.根据权利要求4所述的人源化抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述抗体恒定区 的全长序列如SEQ  ID NO:14或15所示。 7.根据权利要求1所述的人源化抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述抗体选自下 述的重链和轻链： (a)由SEQ ID NO： 17所示氨基酸序列的重链和由SEQ  ID NO： 24所示氨基酸序列的轻 链。 8.根据权利要求1所述的人源化抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述抗体为单链 抗体、 多聚体抗体、 CDR移植 抗体。 9.根据权利要求8所述的人源化抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述单链抗体包 括SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的重链可变区和SEQ  ID NO:10所示氨基酸序列的轻链可变 区， 其中所述重链可变区的C端通过连接肽linker与所述轻链可变区的N端相连， 或所述轻 链可变区的C端通过 连接肽linker与所述重链可变区的N端相连。 10.根据权利要求1所述的人源化抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述抗原结合 片段包括Fab、 Fab ’、 F(ab)2、 F(ab ’)2、 Fv、 scFv ‑Fc融合蛋白、 scFv ‑Fv融合蛋白以及最小识 别单位的至少之一。 11.一种核酸分子， 其特征在于， 所述核酸分子编码权利要求1～10任一项所述的人源 化抗体或其 抗原结合片段。 12.根据权利要求1 1所述的核酸分子， 其特 征在于， 所述核酸分子为DNA。 13.根据权利 要求12所述的核酸分子， 其特征在于， 所述核酸分子具有如SEQ  ID NO:30 所示核苷酸序列或具有SEQ  ID NO:37所示核苷酸序列。 14.一种表达载体， 其特 征在于， 携带权利要求1 1～13任一项所述的核酸分子 。 15.根据权利要求14所述的表达载体， 其特 征在于， 所述表达载体为真核表达载体。 16.一种重组细胞， 其特征在于， 所述重组细胞携带权利要求11～13任一项所述的核酸 分子， 或者表达 权利要求1～10任一项所述的人源化 抗体或其 抗原结合片段。 17.根据权利要求16所述的重组细胞， 其特征在于， 所述重组细胞是通过将权利要求17权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114516917 B 2或18所述的表达载体引入至宿主细胞中而获得的。 18.根据权利要求17所述的重组细胞， 其特征在于， 通过电转导的方法将所述表达载体 引入所述宿主细胞中。 19.根据权利要求16所述的重组细胞， 其特 征在于， 所述重组细胞为真核细胞。 20.根据权利要求16所述的重组细胞， 其特 征在于， 所述重组细胞为哺乳动物细胞。 21.一种药物组合物， 其特征在于， 含有权利要求1～10任一项所述的人源化抗体或其 抗原结合片段， 权利要求11～13任一项所述的核酸分子， 权利要求14～15任一项所述的表 达载体或权利要求16～ 20任一项所述的重组细胞。 22.权利要求1～10任一项所述的人源化抗体、 权利要求11～13任一项所述的核酸分 子、 权利要求14～15任一项所述的表达载体、 权利要求16～20任一项所述的重组细胞或权 利要求21所述的药物组合物在制备药物中的用途， 所述药物用于治疗或者预防疼痛、 癌症、 炎症或炎性疾病、 神经变性疾病、 舍格伦氏综合征、 子 宫内膜异 位、 糖尿病性周围神经病变、 前列腺炎、 盆腔疼痛综合征、 与骨重塑调节失衡相关的疾病以及由结缔组织生长因子异常 信号传导引起的疾病。 23.根据权利要求22所述的用途， 其特征在于， 所述药物用于治疗或预防神经性疼痛、 炎性疼痛、 与癌症有关的疼痛、 与骨折有关的疼痛、 与手术有关的疼痛、 炎性肺病、 间质性膀 胱炎、 痛性膀胱综合征、 炎性肠 疾病、 炎性皮肤病、 雷诺氏综合征、 特发性肺纤维化、 瘢痕(肥 大型、 瘢痕瘤型和其他形式)、 硬化、 心内膜心肌纤维化、 心房纤维化、 骨髓纤维化、 进 行性块 状纤维化(肺)、 肾源性系统性纤维化、 硬皮病、 系统性硬化、 关节纤维化、 眼部纤维化、 非小 细胞肺癌、 乳头状甲状腺癌、 多形性成胶质细胞瘤、 结肠直肠癌、 黑色素瘤、 胆管癌或肉瘤、 急性骨髓性白血病、 大细胞神经内分泌癌、 成神经细胞瘤、 前列腺癌、 成神经细胞瘤、 胰腺 癌、 黑色素瘤、 头 颈鳞状细胞癌或胃癌。 24.一种检测TrkA的试剂盒， 其特征在于， 包括权利要求1～10任一项所述的人源化抗 体。 25.权利要求1～10任一项所述的人源化抗体、 权利要求11～13任一项所述的核酸分 子、 权利要求14～15任一项 所述的表达载体或权利要求16～20任一项 所述的重组细胞在制 备试剂盒中的用途， 所述试剂盒用于检测TrkA或者诊断TrkA相关的疾病。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114516917 B 3