ICS 65.150 CCS B50 DB46 海 南 省 地 方 标 准 DB 46/T 512—2020 合浦珠母贝人工繁育技术规程 Guidelines for Pinctada fucata artificial breeding and seedling technique 2020 - 11 - 16 发布 海南省市场监督管理局 2020 - 12 - 15 实施 发 布 DB46/T 512—2020 前 言 本文件按 GB/T 1.1-2020 给出的规则起草。 本文件由原海南省海洋与渔业厅提出，由海南省农业农村厅归口。 本文件起草单位：中国水产科学研究院南海水产研究所热带水产研究开发中心、中国水产科学研 究院南海水产研究所、三亚热带水产研究院。 本文件主要起草人：陈明强、李有宁、王雨、邓正华、于刚、陈旭、吴开畅、赵旺、魏海军、方 伟。 I DB46/T 512—2020 合浦珠母贝人工繁育技术规程 1 范围 本文件规定了合浦珠母贝（Pinctada fucata Gould）人工繁育环境条件、亲贝、饵料培养、繁育、 贝苗及运输等要求。 本文件适用于合浦珠母贝的人工繁育技术。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 11607 渔业水质标准 NY 5052 无公害食品 海水养殖用水水质 NY 5362 无公害食品 海水养殖产地环境条件 SC/T 2072 马氏珠母贝 亲贝和苗种 SC/T 9103 海水养殖水排放要求 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 合浦珠母贝 Pinctada fucata 合浦珠母贝又称马氏珠母贝（Pinctada martensii Dunker），在动物分类学地位上属于软体动物门 （Mollusca）、瓣鳃纲（Lamellibranchia）、翼形亚纲（ Pterimorphia）、珍珠贝目（Pterioida）、珍珠 贝科（Pteriidae）、珠母贝属（Pinctada），属于暖水性贝类，分布于热带、亚热带的太平洋和印度洋 沿岸，我国主要分布于海南、广东、广西及台湾等省沿海一带海域，是海水珍珠贝类中培育珍珠的主要 贝种。 3.2 亲贝 Brood stocks 天然海区生长或人工养殖的成贝壳长≥6 cm 达到性腺成熟的个体。 3.3 壳长 Shell length 壳前端至壳后端的最大直线距离。 1 DB46/T 512—2020 3.4 壳高 Shell height 壳顶至腹缘的最大距离。 3.5 D 型幼虫 D type larva 又称初期面盘幼虫或直线铰合幼虫，由壳腺分泌形成的两片贝壳包裹了全身，侧面观如英文字母 D。 3.6 壳顶幼虫 Shell top larva D型幼虫经过一段时间的发育，铰合线开始向背部隆起，形成壳顶的幼虫。 3.7 眼点幼虫 Eye point larva 在壳顶幼虫后期，幼虫足的基部出现的一对黑褐色腺体的眼点。 3.8 稚贝 Juvenile shell fish 幼虫向幼贝过渡的一个发育阶段，主要特征是面盘完全退化，钙质的贝壳形成，用鳃呼吸，足部 发达，营附着生活。 3.9 规格合格率 Specification Qualification Rate 达到规格的苗种数量占苗种总数的百分比。 4 环境条件 4.1 育苗场环境 育苗场应选择在避风防潮条件好，周边无工业和生活污染源，取水方便、电力保证、交通便利等 沿海地方建造。海水养殖底质应符合 NY 5362 的规定。 4.2 水质要求 水质符合 GB 11607 、NY 5052 的规定，苗种繁育水环境要求见表 1。 表 1 苗种繁育水环境要求 水温 盐度 溶解氧 （℃） （‰） （mg/L） 亲贝培育 25～29 25～35 ≥5 7.8～8.5 3000～5000 幼虫培育 25～29 25～35 ≥5 7.8～8.5 300～500 项目 pH 光照强度 (Lx) 2 DB46/T 512—2020 表 1 （续） 水温 盐度 溶解氧 （℃） （‰） （mg/L） 稚贝培育 25～29 25～34 ≥5 7.5～8.5 300～500 苗种培育 25～29 24～35 ≥5 7.5～8.5 500～1000 项目 光照强度 pH (Lx) 4.3 育苗设施 4.3.1 育苗场设施 育苗场面积为 6 亩以上，配备育苗室、沉淀池、过滤池、贮水池、育苗池、供水系统、饵料培养 设备、采苗器等。 4.3.2 育苗室 包括亲贝蓄养池、孵化池和育苗池，形状为方形或长方形，池的上方设进水口，池底部设排水口， 配备充气、增氧系统。育苗室设施要求见表 2。 表 2 育苗室设施要求 体积（m3/ind） 项目 水深（m） 蓄养池 1～3 1.0～1.5 孵化池 1～3 1.0～1.5 育苗池 10～30 1.0～1.5 4.3.3 沉淀池 沉淀池的体积为孵化池和育苗池体积的3倍及以上。 4.3.4 过滤池 过滤池形状为方形或长方形，池内铺设有碎石和砂子等过滤材料，具体要求见表 3。 表 3 过滤池的材料要求 层次 材料 孔径大小（mm） 厚度（cm） 1 细砂 ≤0.1 80～100 2 筛绢网布 0.1 0.1～0.2 3 粗砂 2～3 20～40 4 筛绢网布 1 0.2～0.3 5 碎石 15～20 10～20 6 筛绢网布 2 0.2～0.3 7 筛板 20～25 5～8 4.3.5 贮水池 3 DB46/T 512—2020 位置高于育苗池，形状为方形或长方形，建设容积是孵化池和育苗池体积的2倍及以上。 4.3.6 附属设备 包括抽水泵、发电机组、控温设备和水管等。水管选用塑料管或PVC管为宜，忌用金属的水管。 4.3.7 饵料培养设施及设备 包括藻种培养室、室内外培养池等。藻种的培养室要求通风条件好，光线充足，温度可控性好；室 内外培养设施有水泥池、玻璃钢桶、塑料桶、专用培养塑料袋等，饵料培养池面积为育苗池总面积的50％ 以上。室内设备应有常用的培养仪器、显微镜和解剖镜等。 5 亲贝 5.1 亲贝来源 采捕自然海区的野生亲贝或采用原（良）种场选育的亲贝。 5.2 亲贝质量要求 亲贝质量应符合 SC/T 2072 的要求。 5.3 亲贝培育 5.3.1 海区培育 采用直径35 cm～40 cm的锥形笼或双圈笼，以25 只/笼装笼吊养在水深1.5 m～2.0 m的海区养殖培 育，亲贝应符合SC/T 2072要求。 5.3.2 室内培育 在室内蓄养池培育，以20 只/笼吊养水深60 cm～70 cm，离池底10 cm～15 cm，放养密度为每立方 4 4 水体放养150 只。投喂饵料以扁藻为主，金藻及硅藻为辅，日投饵量为5×10 cell/mL～6×10 cell/mL， 每2 d洗池与换水一次，连续充气。水质应符合GB 11607 、NY 5052的要求。 6 饵料培养 6.1 主要种类 等鞭金藻、叉鞭金藻、绿色巴夫藻、扁藻及小球藻等单细胞藻类。 6.2 藻种保存 藻种宜放在试管或三角烧瓶中，置于光照培养箱内保存，光照强度为5000 Lx～10000 Lx。 6.3 设施、设备消毒 4 DB46/T 512—2020 所有需要的设施、设备中的容器、工具等都要经过消毒，消毒方法采用 5 mg/L 高锰酸钾水溶液浸 泡 5 min，再用经臭氧处理的消毒海水冲洗 2～3 次；或用 100 mg/L～300 mg/L 漂白粉（含有效氯 25%～ 35%）水溶液浸泡 30 min，再用经臭氧处理的消毒海水冲洗 3 ～4 次。 6.4 培养液的配制 根据保存的藻类选择适宜的培养液，主要藻类的培养液配方见表 4。 表 4 金藻与扁藻常用培养液配方 金藻常用培养液配方 扁藻常用培养液配方 成分 单位 含量 成分 单位 含量 NaNO3 g 0.06 NaNO3 g 0.05 K2HPO4 g 0.004 KH2PO4 g 0.005 FeC6H5O7 mg 0.5 FeC6H5O7(1%溶液) mL 0.2 维生素 B1 g 0.1～0.5 维生素 B1 mg 200 维生素 B12 mg 0.5～1.5 维生素 B12 µg 200 NaHCO3 g 1 — — 7.8～8.4 pH 7.5～8.5 1000 海水 pH 海水 mL mL 1000 注：表中培养液配方适用于其它单细胞藻类培养的参考值。 6.5 接种 接种前要对藻种进行检查，方法是用吸管吸取 1 滴藻种于载玻片上，放在显微镜下观察 ，其藻体 健壮、活力强、无病害者移入培养液中培养，培养液使用见表 4。 5 5 扁藻的藻种浓度为 3×10 cell/mL～4×10 cell/mL，一、二级培养的比例为 1:2～1:5，生产性培 6 养 1:5～1:20。金藻的藻种浓度为 2.5×10 cell/mL 以上，一、二级培养的比例为 1:3～1:5。 单细胞藻类经过 7 d 左右的一级培养可转入二级培养，生产性培养 5 d～7 d 可用于饵料投喂。 6.6 一级培养 一级培养在500 mL～3000 mL三角烧瓶中进行。三角烧瓶应经120 ℃以上高温消毒30 min ，培养液 和扩种用海水应煮沸消毒。 6.7 二级培养 二级培养在容积为 50 L～100 L 的白色塑料桶或尼龙袋中进行。培养用海水经次氯酸钠溶液(含有 3 3 3 效氯 8%)150 mL/m ～200 mL/m 消毒，10 h～12 h 后，用硫代硫酸钠（Na2S2O3）约 35 g/m 中和。 6.8 生产性培养 2 2 生产性培养在面积为 20 m ～40 m 的饵料培养池中进行，蓄水高度为 80 cm～100 cm。营养盐可采 3 3 用化学纯或工业纯级别。氮肥可选用尿素（CON2H4）或硝酸钠（NaNO3），使用量分别为 50 g/m 或 44 g/m ； 3 磷肥选用磷酸二氢钾（KH2PO4），用量为 4.4 g/m 。 5 DB46/T 512—2020 6.9 日常管理 每天用显微镜对藻类生长情况观察与检查，检查培养液和藻类的颜色变化情况、有无沉淀、附壁 现象及病虫害污染等，发现藻类出现颜色异常、混浊、沉淀、水表面出现菌膜，表明被污染或