(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210869517.9 (22)申请日 2022.07.21 (71)申请人 清华大学深圳国际研究生院 地址 518000 广东省深圳市南 山区西丽 街 道深圳大 学城清华校区A栋二楼 (72)发明人 马少华　汤继元　曹远雄　杨浩威　 赵浩然　 (74)专利代理 机构 深圳市深可信专利代理有限 公司 44599 专利代理师 黄蕴丽 (51)Int.Cl. C12N 5/09(2010.01) C12N 5/071(2010.01) C12M 3/00(2006.01) C12M 1/36(2006.01)C12M 1/34(2006.01) C12M 1/00(2006.01) B01L 3/00(2006.01) (54)发明名称 一种类器官高通 量培养方法 (57)摘要 本发明公开了一种类器官高通量培养方法， 包括以下步骤； S2、 将细胞包裹于分散相1内； S4、 将包裹有细胞的分散相1和分散相2分别注射到 微流控系统的类器官前体制备区内， 分散相1被 分散相2剪切成大小均一的的类器官前体液滴， 剪切成的类器官前体液滴可依次进入到微流控 系统的类器官液滴熟化区并可在该类器官液滴 熟化区内熟化成类器官球体； S6、 通过微流控系 统的输送泵将类器官液滴熟化区内的第一个类 器官球体经3D打印系统的输送管道输送至3D打 印系统的打印喷头处。 本发明可控性好， 保证了 类器官的一致性， 类器官大小均一， 降低了类器 官个体间的差异， 可模拟人体内微环境， 缩短了 类器官的生长与发育时间。 权利要求书2页 说明书6页 附图5页 CN 115354030 A 2022.11.18 CN 115354030 A 1.一种类 器官高通 量培养方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： S2、 将细胞包裹于分散相1内； S4、 将包裹有细胞的分散相1和分散相2分别注射到微流控系统的类器官前体制备区 内， 分散相1被分散相2剪切成大小均一的的类器官前体液滴， 剪切成的类器官前体液滴可 依次进入到微流控系统的类器官液滴熟化区并可在该类器官液滴熟化区内熟化成类器官 球体； S6、 通过微流控系统的输送泵将类器官液滴熟化区内的第 一个类器官球体经3D打印系 统的输送管道输送至 3D打印系统的打印喷头处； S8、 通过3D打印系 统的类器官识别检测单元检测打印喷头处是否有类器官球体， 当类 器官识别检测单元检测到打印喷头处有类器官球体时， 类器官识别检测单元输出类器官信 号到3D打印系统的控制单 元； S10、 通过控制单元控制3D打印系统的驱动单元动作， 通过驱动单元驱动打印喷头向下 移动至第一个血管床微流控芯片的血管床 培养室的底部， 停留1 ‑2秒钟后， 第一个类器官球 体会吸附于第一个血管床微流控芯片的血管床培养 室的底部， 如此第一个类器官球体即打 印至第一个血管床微流控芯片的血管床培养室内， 完毕后， 通过驱动单元驱动打印喷头回 到初始位置； S12、 按照步骤S6至步骤S10的方法依次将类器官液滴熟化区内的剩下的类器官球体打 印至剩下的血 管床微流控芯片的血 管床培养室内； S14、 对所有血 管床微流控芯片的血 管床培养室内的类 器官球体进行培 养。 2.根据权利要求1所述的类器官高通量培养方法， 其特征在于， 所述类器官前体制备区 为一Y型结构， 所述Y型结构包括第一入口管道、 第二入口管道和连接管道， 所述第一入口管 道的第一端和第二入口管道的第一端分别与第一注射器、 第二注射器连接， 所述第一注射 器连接有第一注射泵， 所述第二注射器连接有第二注射泵， 第一入口管道的第二端和第二 入口管道的第二端均与所述连接管道的第一端连接， 所述类器官液滴熟化区为一出口管 道， 所述连接管道的第二端与所述出口管道连接； 所述步骤S4包括以下步骤； S42、 将分散相1、 分散相2分别置 于第一注射器内和第二注射器内； S44、 通过第一注射泵将第一注射器内的分散相1注射到第一入口管道内， 通过第二注 射泵将第二注射器内的分散相2注 射到第二入口管道内， 在连接管道内， 分散相1被分散相2 剪切成大小均一的类器官前体液滴， 剪切成的类器官前体液滴可依次进入到出口管道内并 可在该出口管道内熟化成类 器官球体。 3.根据权利要求1所述的类器官高通量培养方法， 其特征在于， 所述类器官前体制备区 为一T型结构， 所述T 型结构包括第一入口管道、 第二入口管道和连接管道， 所述第一入口管 道的第一端和第二入口管道的第一端分别与第一注射器连接、 第二注射器连接， 所述第一 注射器连接有第一注射泵， 所述第二注射器连接有第二注射泵， 第一入口管道的第二端和 第二入口管道的第二端分别与所述连接管道的第一端连接， 所述类器官液滴熟化区为一出 口管道， 所述连接管道的第二端与所述出口管道连接； 所述步骤S4包括以下步骤： S42、 将分散相1、 分散相2分别置 于第一注射器内和第二注射器内；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115354030 A 2S44、 通过第一注射泵将第一注射器内的分散相1注射到第一入口管道内， 通过第二注 射泵将第二注射器内的分散相2注 射到第二入口管道内， 在连接管道内， 分散相1被分散相2 剪切成大小均一的类器官前体液滴， 剪切成的类器官前体液滴可依次进入到出口管道内并 可在该出口管道内熟化成类 器官球体。 4.根据权利要求1所述的类器官高通量培养方法， 其特征在于， 所述类器官前体制备区 为一十字型结构， 所述十字型结构包括第一入口管道、 两个呈相对设置的第二入口管道和 连接管道， 所述第一入口管道和连接管道呈相对设置， 所述第一入口管道的第一端与第一 注射器连接， 第一入口管道的第二端与所述连接管道的第一端连接， 所述第一注射器连接 有第一注射泵， 两个第二入口管道的第一端分别与两个第二注射器连接， 两个第二入口管 道的第二端分别与所述连接管道的第一端连接， 所述两个第二注射器分别连接有两个第二 注射泵， 所述类器官液滴熟化区为一出 口管道， 所述连接管道的第二端与所述出 口管道连 接； 所述步骤S4包括以下步骤： S42、 将分散相1置 于第一注射器内， 将分散相2分别置 于两个第二注射器内； S44、 通过第一注射泵将第一注射器内的分散相1注射到第一入口管道内， 通过两个第 二注射泵分别将 两个第二注射器内的分散相2注 射到两个第二入口管道内， 在连接管道内， 分散相1被注射到两个第二入口管道内的分散相2剪切成大小均一的类器官前体液滴， 剪切 成的类器官前体液滴可依次进入到出口管道内并可在该 出口管道内熟化成类 器官球体。 5.根据权利要求1所述的类器官高通量培养方法， 其特征在于， 所述步骤S2中， 所述细 胞为原代肿瘤组织细胞、 干细胞或细胞系。 6.根据权利要求1所述的类器官高通量培养方法， 其特征在于， 所述分散相 1的材质包 括基质胶、 胶原蛋白或明胶。 7.根据权利要求1所述的类器官高通量培养方法， 其特征在于， 所述分散相2 的材质包 括氟油或植物油。 8.根据权利要求1所述的类器官高通量培养方法， 其特征在于， 所述步骤S4中， 将类器 官前体液滴熟化成类 器官球体的方法包括温度交联法、 酶促交联法、 离 子交联或光交联法。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115354030 A 3