(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210886598.3 (22)申请日 2022.07.26 (71)申请人 江苏硕世生物科技股份有限公司 地址 225300 江苏省泰州市药城大道837号 (72)发明人 高杰锋　张桢珍　张兴超　梁蜜　 王萍　李鹏飞　金巍　刘中华　 王国强　 (74)专利代理 机构 上海锻创知识产权代理有限 公司 314 48 专利代理师 顾继光 (51)Int.Cl. C12M 1/12(2006.01) C12M 1/34(2006.01) C12M 1/00(2006.01) G01N 33/569(2006.01)G01N 33/58(2006.01) C12N 5/09(2010.01) (54)发明名称 一种循环肿瘤细胞收集染色观察装置 (57)摘要 本发明提供一种细胞收集及染色一体化装 置， 该装置为一个套装， 包括第一组件和第二组 件； 所述第一组件为过滤板， 所述过滤板上设置 有滤孔； 所述第二组件为基板， 基板上开设有用 于放置所述第一组件的凹槽； 所述过滤板和基板 的材质为透光高分子材料； 所述过滤板先进行亲 水处理， 然后偶联含双吖丙啶感光物质， 之后进 行表面疏水化处理。 本发明提供一个集循环肿瘤 细胞的收集、 染色、 观察计数于一体的高分子透 光装置， 实现了对外周血CTC高效、 快速的富集和 计数； 本发明实验流程简单， 极大的减少了实验 过程中的细胞损失， 对于实现整个实验流程的自 动化极具潜力。 权利要求书1页 说明书7页 附图3页 CN 115287158 A 2022.11.04 CN 115287158 A 1.一种细胞收集及染色一体化装置， 该装置为 一个套装， 其特 征在于， 包括： 第一组件， 所述第一组件为过 滤板， 所述过 滤板上设置有滤孔； 第二组件， 所述第二组件为基板， 基板上开设有用于放置所述第一组件的凹槽； 所述过滤板和基板的材质为透光高分子材 料； 所述过滤板先进行亲水处理， 然后偶联含双吖丙啶感光物质， 之后进行表面疏水化处 理。 2.根据权利要求1所述的细胞收集及染色一体化装置， 其特征在于， 所述滤孔的直径为 8‑20 μm。 3.根据权利要求1所述的细胞收集及染色一体化装置， 其特征在于， 所述透光高分子材 料选自聚苯乙烯或其 衍生物、 甲基丙烯酸甲酯中的一种或几种。 4.根据权利要求1所述的细胞收集及染色一体化装置， 其特征在于， 所述过滤板进行亲 水处理的过程包括如下步骤： 将亲水材料配置成溶液， 置于过滤板的滤孔中， 进行电晕处理， 电压： 2 ‑20V， 电流： 1 ‑ 10A， 处理速度1～10mm/秒， 电晕处理设为电极间距离1 ‑10mm， 工作台移动速度为5 ‑8m/min， 电晕处理后， 用缓冲液清洗， 制得偶联胶原的过 滤板。 5.根据权利要求4所述的细胞收集及染色一体化装置， 其特征在于， 所述亲水材料选自 纤连蛋白、 层粘连蛋 白、 胶原蛋 白、 RGD多肽、 Boc ‑Lys(Z)‑OH、 肽聚糖、 垂体腺苷酸环化酶激 活多肽‑38、 多肽YY、 氨基基团的N,N ‑二甲基氨基乙基甲基丙烯酸酯、 N,N ‑二乙基氨基乙基 甲基丙烯酸酯、 N,N ‑二甲基氨基丙基丙烯酰胺及其盐中的一种或一种以上。 6.根据权利要求4所述的细胞收集及染色一体化装置， 其特征在于， 所述偶联胶原的过 滤板进一 步偶联含双吖丙啶感光物质， 制得偶联胶原和含双吖丙啶感光物质的过 滤板。 7.根据权利要求6所述的细胞收集及染色一体化装置， 其特征在于， 所述含双吖丙啶感 光物质选自琥珀酰亚胺4,4' ‑叠氮戊酸、 磺基琥珀酰亚胺4,4' ‑叠氮戊酰胺、 琥珀酰亚胺6 ‑ (4,4'‑叠氮戊酰胺)己酸、 磺基琥珀酰亚胺6 ‑(4,4'‑叠氮戊酰胺)己酸盐、 磺基琥珀酰亚胺 2‑((4,4'‑叠氮戊酰胺)乙基) ‑1,3'‑二硫代丙酸酯、 琥珀酰亚胺2 ‑((4,4'叠氮戊酰胺)乙 基)‑1,3'‑二硫代丙酸酯、 磺基琥珀酰亚胺2 ‑((4,4'‑叠氮戊酰胺)乙基) ‑1,3'‑二硫代丙酸 酯中的一种或几种。 8.根据权利要求6所述的细胞收集及染色一体化装置， 其特征在于， 将偶联胶原和含双 吖丙啶感光物质的过滤板浸泡于疏水材料配置成的溶液中浸泡， 进行表面疏水化处理， 所 述疏水材料为如下式所示的氟代烷基硅烷： F3C‑(CF2)m‑(CH2)n‑Si(X)3‑p(R)p， 其中m＝0 ‑15； n＝1‑5； p＝0、 1或2； R是C1 ‑8烷基或氢 原子； X是可水解基团。 9.根据权利要求1所述的细胞收集及染色一体化装置， 其特征在于， 所述装置的基板和 过滤板通过3D打印方式制得。 10.一种如权利要求1 ‑9中任一项所述装置在循环肿瘤 细胞收集中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115287158 A 2一种循环肿瘤细胞收集 染色观察装置 技术领域 [0001]本发明涉及 细胞收集 技术领域， 具体涉及一种循环肿瘤 细胞收集染色观察装置 。 背景技术 [0002]CN108220152B公开一种循环肿瘤细胞捕获系统， 其使用滤膜自动化过滤收集CTC， 只可用于过滤， 不可直接用于后续的染色和观察， 虽然收集效率高， 但是用于CTC染色计数 时， 需对细胞进行转移， 过程损失大， 操作繁琐。 [0003]CN106076441B公开一种使用滤膜自动化过滤收集CTC， 只可用于过滤， 不可直接用 于后续的染色和观察， 虽然收集效率高， 但是用于CTC染色计数时， 需对细胞进 行转移， 过程 损失大， 操作繁琐。 其微流控装置流道狭长， 压力大， 非常容易 堵塞， 造成实验样本的浪费和 实验的失败； 未对微流控材料表面处理就直接染色， 荧光本底高， 不利于后续计数的自动判 读； 没有将细胞进行化学固定于材料上， 细胞易移动， 不利于后续的计数； 微流控芯片 需要 开模， 成本高， 制备工艺复杂。 [0004]CN107988042B公开一种循环肿瘤细胞分离装置及其检测方法， 该发明利用离心力 将未处理的全血样品从一个室通过膜快速传输到另一个室， 然而装置利用了离心原理， 容 易造成膜脱落， 没有将细胞进行化学固定于材料上， 细胞易移动， 不利于后续的计数， 需要 匹配特殊的离心机 。 发明内容 [0005]鉴于此， 本发明的目的在于提供一种细胞收集及染色一体化装置 。 [0006]本发明的目的是通过以下技 术方案来实现的： [0007]本发明提供一种细胞收集及染色一体化装置， 该装置为 一个套装， 包括： [0008]第一组件， 所述第一组件为过 滤板， 所述过 滤板上设置有滤孔； [0009]第二组件， 所述第二组件为基板， 基板上开设有用于放置所述第一组件的凹槽， 所 述过滤板的厚度可以比所述基板厚， 过滤板的下端放置于凹槽后， 过滤板的上端可以伸出 凹槽， 便于其从基板取 出； [0010]所述过滤板和基板的材质为透光高分子材 料； [0011]所述过滤板先进行亲水处理， 然后偶联含双吖丙啶感光物质， 之后进行表面疏水 化处理。 [0012]所述滤孔的直径为8 ‑20 μm； [0013]所述透光高分子材料选自聚苯乙烯或其衍生物、 甲基丙烯酸甲酯中的一种或几 种。 [0014]所述过滤板的厚度为5 ‑100mm， 长度为3 ‑10mm， 宽为3‑10mm； [0015]所述基板尺寸 为76x 26mm， 厚度1m m； [0016]底部厚度为190 μm+20 μm。 [0017]优选的， 所述滤孔的直径为8 μm或10 μm的圆孔。说　明　书 1/7 页 3 CN 115287158 A 3