(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210904894.1 (22)申请日 2022.07.29 (71)申请人 深圳技术大学 地址 518118 广东省深圳市坪 山区石井街 道兰田路3 002号 (72)发明人 宋莎莎　 (74)专利代理 机构 嘉兴华申知识产权代理事务 所(普通合伙) 33454 专利代理师 葛学超　徐桂红 (51)Int.Cl. C12M 1/36(2006.01) C12M 1/24(2006.01) C12M 1/12(2006.01) C12M 1/02(2006.01) C12M 1/00(2006.01)B04B 5/04(2006.01) B04B 7/00(2006.01) B04B 15/02(2006.01) (54)发明名称 一种细胞外泌体过滤提取装置及提取方法 (57)摘要 本发明公开了一种细胞外泌体过滤提取装 置及提取方法， 涉及细胞外泌体提取技术领域， 本发明包括底板， 底板上设有离心装置以及滤取 装置， 离心装置主要用于离心操作， 滤取装置主 要用于过滤提取； 离心装置包括位于底板上方的 方形护板以及离心电机， 离心电机位于方形护板 内部中心位置处， 离心电机上部输出轴设有十字 座， 十字座上端连接有试管座， 试管座内部设有 夹持组件； 方形护板上设有冷却组件， 冷却组件， 冷却组件包括帕尔贴制冷片， 方形护板上端设有 出风管， 出风管整体呈环形方管， 且出风管下端 开设有出风口， 出风口与方形护板相互垂直， 控 制模块控制帕尔贴制冷片工。 本发 明为一种细胞 外泌体过滤提取装置及提取方法， 细胞外泌体提 取效果好。 权利要求书2页 说明书7页 附图10页 CN 115197827 A 2022.10.18 CN 115197827 A 1.一种细胞外泌体过滤提取装置， 其特征在于： 包括底板(1)， 所述底板(1)上设有离心 装置以及滤 取装置； 所述离心装置包括位于所述底板(1)上方的方形护板(2)以及离心电机(3)， 所述离心 电机(3)位于所述方形护板(2)内部中心位置处， 所述离心电机(3)上部输出轴设有十字座 (4)， 所述十 字座(4)上端连接有试 管座(5)， 所述试 管座(5)内部设有夹持组件； 所述方形护板(2)上设有冷却组件， 所述冷却组件， 所述冷却组件包括设置在所述方形 护板(2)内部侧壁的若干帕尔 贴制冷片(6)， 若干所述帕尔贴制冷片(6)制冷端靠向所述试 管座(5)， 所述方形护板(2)上端设有 出风管(7)， 所述出风管(7)整体呈环形方管， 且 所述出 风管(7)下端开设有出风口， 所述出风口与所述方 形护板(2)相互垂直； 所述夹持组件包括设置在所述试管座(5)内壁的两组第一弹簧(8)， 一组所述弹簧(8) 位于另一组所述弹簧(8)正下方， 每组所述弹簧(8)包含若干所述弹簧(8)， 若干所述弹簧 (8)围绕所述试管座(5)等间距阵列分布， 每个所述弹簧(8)端部设有弧形块(9)， 所述弧形 块(9)远离所述弹簧(8)一侧壁设有凸块(10)， 所述弧形块(9)之间设有离心试管(11)， 所述 离心试管(11)下部侧壁 卡设有若干滑槽， 所述凸块(10)与所述滑槽相互适配； 所述滤取组件包括位于所述底板(1)上部的滤取管(12)、 活动设置在所述滤取管(12) 内部的滤取内芯(13)， 所述滤取管(12)位于所述方形护板(2)侧部， 所述滤取管(12)整体呈 漏斗状， 所述滤取内芯(13)整体呈圆台状结构， 且所述滤取内芯(13)外壁与所述滤取管 (12)内壁贴合， 所述滤取内芯(13)上部端部设有凸圈(14)， 所述凸圈(14)上端侧壁贴合所 述滤取管(12)侧壁， 所述凸圈(14)上端内壁倾斜设置， 所述滤取内芯(13)中部开设有若干 滤取通孔， 若干所述滤取通孔整理呈波浪状结构， 若干所述滤取通孔等间距阵列分布， 每个 所述滤取通孔侧壁设有设有若干毛细凸起(15)， 若干所述毛细凸起(15)等间距阵列分布， 所述滤取管(12)侧壁开设有螺纹通孔， 所述滤取内芯(13)侧壁开设有梯度通孔， 所述梯度 通孔内壁设有密封圈(16)， 所述梯度通孔与所述螺纹通孔位置相互适配， 所述螺纹通孔内 部螺纹连接有 连接管(17)， 所述连接管(17)外壁设有螺纹线， 且与所述螺纹通孔螺纹适配， 所述连接管(17)一端位于所述梯度通孔中， 且端部与所述密封圈(16)贴合， 所述连接管 (17)另一端部设有辅助螺母， 所述连接管(17 )高度位于所述凸圈(14)下端， 所述连接管 (17)一端连接有出 料弯管(18)， 所述出 料弯管(18)端部设有阀门(2 9)。 2.根据权利要求1所述的一种细胞外泌体过滤提取装置， 其特征在于： 所述底板(1)上 方开设有两个圆形槽， 两个所述圆形槽位于所述方形护板(2)一侧， 两个所述圆形槽内分布 设有第一烧杯(19)以及第二烧杯(20)， 所述第一烧杯(19)位于所述滤取管(12)下方， 所述 第二烧杯(20)位于所述出 料弯管(18)下端。 3.根据权利要求1所述的一种细胞外泌体过滤提取装置， 其特征在于： 所述底板(1)上 方设有支架(21)， 所述方形护板(2)下部顶角位置处与所述支架(21)上端 连接， 所述方形护 板(2)采用不锈钢 钢板材质。 4.根据权利要求1所述的一种细胞外泌体过滤提取装置， 其特征在于： 所述底板(1)上 方设有风机(22)以及控制模块(28)， 所述风机(22)出风口处设有出风弯管(23)， 所述出风 弯管(23)上端与所述出风管(7)贯 通连接。 5.根据权利要求1所述的一种细胞外泌体过滤提取装置， 其特征在于： 所述方形护板 (2)侧壁设有滑轨(24)， 所述滑轨(24)内部活动设有滑块(25)， 所述滑块(25)一端与所述滤权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115197827 A 2取管(12)侧壁连接 。 6.根据权利要求1所述的一种细胞外泌体过滤提取装置， 其特征在于： 所述底板(1)底 部顶角位置处设有支腿(26)， 所述支腿(26)底部设有橡胶块(27)。 7.一种细胞外泌体过滤提取装置的提取方法， 其特征在于： 所述一种细胞外泌体过滤 提取装置为权利要求1 ‑6中任意一项所述的一种细胞外泌体过滤提取装置， 所述提取方法 包括以下步骤： S1： 选取细胞溶液的液体， 然后对所述液体进行生物学培养， 得到样本溶液， 选取一定 量样本溶液， 将溶液添加入所述离心试管(11)中， 然后将离心试管(11)放置在三个所述弧 形块9之间， 并将离心试管(11)侧壁滑槽与凸块10对齐， 将所述凸块10滑入所述滑槽内部， 实现与所述离心试管(11)内部滑槽相互卡和， 再通过控制模块(28)设定转速以及离心时 间， 离心电机(3)带动十字座(4)旋转， 十字座(4)带动 试管座(5)旋转， 试管座(5)带动 再带 动离心试 管(11)进行第一次离心操作； S2： 第一次离心完成后， 将离心试管(11)内部离心完成的液体从滤取管(12)上端倒入 滤取管(12)中， 液体从滤取内芯(13)的滤取通孔中流出， 在弯曲的滤取通孔内经过毛细凸 起(15)的过滤， 得到下清液， 下清液从滤取管(12)下端进入到第一烧杯(19)中， 实现去除沉 渣收集上清液， 以去除活细胞及较大的杂质； S3： 通过所述滑块25在滑轨24上滑动， 取下滤取管(12)， 转动连接管(17)， 使得连接管 (17)端部不在位于梯度通孔中， 再取出滤取内芯(13)， 同时对 滤取内芯(13)、 滤取管(12)以 及离心试管(11)进行清洗， 清洗完成后， 并将滤取内芯(13)、 滤取管(12)重新安装回原位 置； S4： 将步骤S2中第一烧杯(19)内部 的上清液再次加入到离心试管(11)中， 重新通过控 制模块(28)设定离心时间， 进行二次离心操作， 重复步骤S2， 再次得到上清液， 此次实现清 除死细胞和细胞碎片， 再次重复步骤S3； S5： 将步骤S4 中得到的上清液， 再 次加入到离心试管(11)中， 重新通过控制模块(28)设 定离心时间， 进 行强力离心， 再将 离心试管(11)中的液体倒入至滤取管(12)中， 此次去除上 清液， 得到沉淀， 将沉淀以10 0 μL PBS重悬纯化提取， 得到细胞外泌体。 8.根据权利要求7所述的一种细胞外泌体过滤提取装置的提取方法， 其特征在于： 在离 心电机(3)工作时， 所述冷却组件同步工作， 所述控制模块(28)控制所述帕尔 贴制冷片(6) 工作， 所述帕尔 贴制冷片(6)端部制冷， 实现对高速旋转的试管座(5)以及离心试管(11)进 行降温， 帕尔贴制冷片(6)紧贴方形护板(2)一端为导热端， 使得方形护板(2)温度升高， 所 述风机(22)开始工作， 实现吹风， 最终从出风管(7)处出风， 带动所述方形护板(2)表 面热空 气流动， 实现对所述方 形护板(2)降温。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115197827 A 3