(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210921885.3 (22)申请日 2022.08.02 (71)申请人 周口师范学院 地址 466000 河南省周口市川汇区文昌大 道东段 (72)发明人 何乐　刘永闯　王正兵　孙忠科　 田二丽　岳宗豪　陈璨　郑曼曼　 崔涵　杨笑星　姜欣宇　 (74)专利代理 机构 洛阳九创知识产权代理事务 所(普通合伙) 41156 专利代理师 袁方 (51)Int.Cl. C12N 9/42(2006.01) C12N 11/10(2006.01) C12N 11/14(2006.01)C12M 1/00(2006.01) (54)发明名称 固定化纤维素酶、 固定化纤维素酶的制备方 法及制备装置 (57)摘要 固定化纤维素酶、 固定化纤维素酶的制备方 法及制备装置， 固定化纤维素酶的制备方法包括 以下步骤： 1)、 将海藻酸钠溶液、 纳米二氧化硅、 纤维素酶以及戊二醛混合均匀后滴入氯化钙溶 液中， 得到固定化酶小球； 2)、 将步骤1)中得到的 固定化酶小球浸泡在聚乙烯亚胺溶液中， 并经紫 外线照射； 3)、 将经步骤2)处理过的固定化酶小 球在氯化钙溶液中浸泡后取出， 即得到固定化纤 维素酶。 本发明可使纤维素酶可多次重复利用， 提高其利用率。 权利要求书1页 说明书6页 附图1页 CN 115232803 A 2022.10.25 CN 115232803 A 1.固定化纤维素酶的制备 方法， 其特 征在于： 包括以下步骤： 1)、 将海藻酸钠溶液、 纳米二氧化硅、 纤维素酶以及戊二醛混合均匀后滴入氯化钙溶液 中， 得到固定化酶小球； 2)、 将步骤1)中得到的固定化酶小球浸泡在聚乙烯亚胺溶 液中， 并经紫外线照射； 3)、 将经步骤2)处理过的固定化酶小球在氯化钙溶液中浸泡后取出， 即得到固定化纤 维素酶。 2.根据权利要求1所述的固定化纤维素酶的制备方法， 其特征在于： 海藻酸钠、 纳米二 氧化硅、 纤维素酶、 戊二醛的质量配比为： 海藻酸钠溶液20 ‑40份、 纳米二氧化硅5 ‑15份、 纤 维素酶1‑10份、 戊二醛5 ‑20份， 步骤1)和步骤3)中氯化钙溶液的浓度为1 ‑3％， 步骤2)中的 聚乙烯亚胺溶 液的浓度为1 ‑3％。 3.根据权利要求1所述的固定化纤维素酶的制备方法， 其特征在于： 步骤2)中， 紫外线 波长为254 nm， 紫外线照射时间为0.5 ‑1.5h。 4.根据权利要求1所述的固定化纤维素酶的制备方法， 其特征在于： 步骤3)中， 将经步 骤2)处理过的固定化酶小球在氯化钙和聚乙烯 亚胺混合溶液中浸泡后取出， 得到固定化纤 维素酶， 其中聚乙烯亚胺溶 液的浓度为1 ‑3％。 5.根据权利要求1所述的固定化纤维素酶的制备方法， 其特征在于： 将步骤3)中得到的 固定化纤维素酶置于紫胶溶液中浸泡半小时， 浸泡后取出即得到具有紫胶膜的固定化纤维 素酶， 其中紫胶溶 液的浓度为3 ‑6％。 6.根据权利要求1所述的固定化纤维素酶的制备方法， 其特征在于： 将步骤1)中得到的 固定化酶小球经蘸取氯化钙溶 液的针进行穿刺， 然后再 经步骤2)处 理。 7.实施权利要求6 中的穿刺固定化酶小球的固定化纤维素酶的制备装置， 其特征在于： 包括用于输送球体(8)的输送机构(6)和夹设在输送机构(6)上方的机架(2)， 机架(2)上由 下至上设有吸附体(7)和升降座(3)， 吸附体(7)中吸附有氯化钙溶液， 升降座(3)的下沿间 隔设有多个穿刺针(4)， 穿刺针(4)可随升降座(3)而升降， 并穿过吸附体(7)后刺入位于输 送带上的球体(8)。 8.根据权利要求7所述的固定化纤维素酶的制备装置， 其特征在于： 在机架(2)上位于 吸附体(7)的外周均匀间隔设有 多个向吸附体(7)中通入氯化钙溶 液的接头(5)。 9.根据权利要求7所述的固定化纤维素酶的制备装置， 其特征在于： 穿刺针(4)的外缘 为粗糙面。 10.固定化纤维素酶， 其特征在于： 通过权利要求1 ‑6所述的任一固定化纤维素酶的制 备方法制备 得到。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115232803 A 2固定化纤维素酶、 固定化 纤维素酶的制备方 法及制备 装置 技术领域 [0001]本发明涉及生物材料领域， 具体的说是固定化纤维素酶、 固定化纤维素酶的制 备 方法及制备装置 。 背景技术 [0002]纤维素酶具有巨大的生物技术潜力， 近些年来， 其已经在食品、 纺织工业、 饲料、 医 疗、 中药提取以及新能源等诸多邻域扮演着至 关重要的角色。 但是， 纤维素酶在生物技术和 农业应用中大多存在热稳定性和储存稳定性差的问题， 这些缺陷导致纤维素酶的可重复使 用率较低， 造成了纤维素酶资源的极大的浪费。 且游离纤维素酶对热、 高离子浓度、 强酸、 强 碱及部分有机溶剂等均不够稳定， 很容 易在水溶液中失活而降低其催化能力。 发明内容 [0003]本发明旨在提供固定化纤维素酶、 固定化纤维素酶的制 备方法及制 备装置， 使纤 维素酶可多次重复利用， 提高其利用率。 [0004]为了解决以上技术问题， 本发明采用的具体方案为： 固定化纤维素酶的制备方法， 包括以下步骤： [0005]1)、 将海藻酸钠溶液、 纳 米二氧化硅、 纤维素酶以及戊二醛混合均匀后滴入氯化钙 溶液中， 得到固定化酶小球； [0006]2)、 将步骤1)中得到的固定化酶小球浸泡在聚乙烯亚胺溶 液中， 并经紫外线照射； [0007]3)、 将经步骤2)处理过的固定化酶小球在氯化钙溶液中浸泡后取出， 即得到固定 化纤维素酶。 [0008]优选的， 海藻酸钠、 纳 米二氧化硅、 纤维素酶、 戊二醛的质量配比为： 海藻酸钠溶液 20‑40份、 纳米二氧化硅5 ‑15份、 纤维素酶1 ‑10份、 戊二醛5 ‑20 份， 步骤1)和步骤3)中氯化 钙溶液的浓度为1 ‑3％， 步骤2)中的聚乙烯亚胺溶 液的浓度为1 ‑3％。 [0009]优选的， 步骤2)中， 紫外线 波长为254 nm， 紫外线照射时间为0.5 ‑1.5h。 [0010]优选的， 步骤3)中， 将经步骤2)处理过的固定化酶小球在氯化钙和聚乙烯亚胺混 合溶液中浸泡后取 出， 得到固定化纤维素酶， 其中聚乙烯亚胺溶 液的浓度为1 ‑3％。 [0011]优选的， 将步骤3)中得到 的固定化纤维素酶置于紫胶溶液中浸泡半小时， 浸泡后 取出即得到具有紫胶膜的固定化纤维素酶， 其中紫胶溶 液的浓度为  3‑6％。 [0012]优选的， 将步骤1)中得到 的固定化酶小球经蘸取氯化钙溶液的针进行穿刺， 然后 再经步骤2)处 理。 [0013]实施上述穿刺固定化酶小球的固定化纤维素酶的制备装置， 包括用于输送球体的 输送机构和夹设在输送机构上方 的机架， 机架上 由下至上设有吸 附体和升降座， 吸 附体中 吸附有氯化钙溶液， 升降座的下沿间隔设有多个穿刺针， 穿刺针可随升降座而升降， 并穿过 吸附体后刺入位于 输送带上的球体。 [0014]优选的， 在机架上位于吸附体的外周均匀间隔设有多个向吸附体中通入氯化钙溶说　明　书 1/6 页 3 CN 115232803 A 3