(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210952945.8 (22)申请日 2022.08.09 (71)申请人 杰灵仪器制造 （天津） 有限公司 地址 300074 天津市南 开区复康路3号中天 大厦A座6 01 (72)发明人 万俊　齐一伯　 (51)Int.Cl. C12M 1/00(2006.01) C12M 1/34(2006.01) G06K 7/14(2006.01) (54)发明名称 一种对培养过程进行实时监测与检测的高 通量厌氧培 养装置 (57)摘要 本发明提供一种用于高通量厌氧培养细胞 的微孔板， 包括常规的微孔板主板和以及配套的 覆膜， 配合后整个板体呈矩形， 其中： 主板 上平行 设有多行排列的第一微孔， 并且 所述主板采用高 透光材料； 主板长端的中间部分是用于培养细胞 的第一微孔， 两个短端分别设有1个第二微孔和 多个第一微孔纵向合并的纵向孔； 主板的四周边 缘均略高于内部的微孔和纵向孔的上水平面； 短 端的纵向孔用于放置除氧试剂， 其中所述除氧试 剂是商用除氧试剂； 第二微孔形状与第一微孔相 同， 并用于放置除氧指示剂。 本发明的微孔板具 有结构简单、 厌氧效果突出优点， 从而能够取代 大型厌氧培养装置， 并适用于野外或其他没有培 养条件的环境下进行 快速采样和厌氧培 养。 权利要求书1页 说明书6页 附图2页 CN 115109680 A 2022.09.27 CN 115109680 A 1.一种用于高通量厌氧培养细胞的微孔板， 包括常规的微孔板主板和以及配套的覆 膜， 配合后整个板体呈矩形， 其中： (1)主板上平行设有多行排列的第一微孔， 第一微孔可以根据生物培养需要设置为U 型、 V型以及平底型等形状， 并且所述主板采用高透光材料， 能适于液体培养， 能从上部和底 部清晰观测每 个微孔中的细胞生长状态； (2)主板长端的中间部分是用于培养细胞的第一微孔， 两个短端分别设有1个第二微孔 和多个第一 微孔纵向合并的纵向孔； (3)主板的四周边缘均略高于内部的微孔和纵向孔的上水平面， 以便于在密闭状态下， 微孔和纵向孔中的气体从上部流 通； (4)覆膜是高透光防菌膜， 能隔绝空气和微 孔中的气体交换； (5)短端的纵向孔， 用于放置除氧 试剂； (6)第二微孔形状与第一 微孔相同， 并用于放置除氧指示剂。 2.权利要求1所述的微孔板， 其中可以使用与主板匹配的顶盖来取代防菌覆膜， 其中所 述底盖是高透亮防菌 盖。 3.权利要求1或2所述的微孔板， 其 中所述主板边缘的高度选自： 0.1mm到10mm， 或1mm到 10mm， 或2mm到8mm， 或3mm到7mm， 或4mm到6mm， 或5mm。 4.权利要求1或2所述的微孔板， 其中所述主板还包含 除氧试剂、 除氧指示剂， 和/或脱 毒试剂。 5.权利要求4所述的微孔板， 其中所述主板的一端纵向孔、 第二微孔分别预置除氧试 剂、 除氧指示剂， 另一端的纵向孔预置脱 毒试剂。 6.权利要求5所述的微 孔板， 其中所述除氧 试剂是商用除氧 试剂。 7.权利要求6所述的微 孔板， 其中所述商用除氧 试剂是三菱MGC除氧 试剂。 8.权利要求1或2或5或6或7所述的微孔板， 其中所述微孔板主板的侧面， 还设有二维 码， 所述二维码经过培养的扫描装置识别后， 可提供样本加载、 培养过程参数， 其中所述参 数包括： 取样时间、 采样地 点、 样本类型、 样本名称、 培 养条件等。 9.权利要求8 所述的微孔板， 其中所述微孔板材料选自PMMA、 PS、 PC、 CR39、 SAN、 TPX以及 各种光学树脂、 透明玻璃钢。 10.权利要求9所述的微孔板， 其中所涉及的厌氧培养， 是指对生物细胞的厌氧培养， 所 述生物细胞包括微生物、 动植物细胞， 愈伤组织， 类器官等由单个和/或多个细胞组成的单 个细胞、 多个细胞集 合以及细胞组合 等。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115109680 A 2一种对培养过 程进行实时监测与检测的高通量 厌氧培养装 置 技术领域 [0001]本发明涉及 一种厌氧培养容器， 具体是涉及一种培养过程进行实时监测与检测的 高通量厌氧培 养微孔板， 该微 孔板同时能用于野外取样和厌氧 液体培养。 [0002]发明背景 [0003]生物细胞的培养， 在生物学研究过程中是非常重要的手段。 虽然大部分的培养过 程都是需氧的， 但仍然有一部分生物细胞的培养是需要厌氧条件的， 特别是一些兼性厌氧 细胞和专性厌氧细胞。 [0004]为了营造厌氧环境， 现有技术通常将 所述培养板或培养皿置于培养容器中进行厌 氧培养。 例如， 中国实用新型专利201920976181.X公开了一种厌 氧性微生物培养箱， 包括底 架、 培养室、 取样室、 气路通道和电控系统。 该专利提供了一种气路系统简单， 操作系统简 单， 设备体积小， 占地小的厌 氧培养箱。 虽然该专利已经比现有技术的厌氧培养箱能够更好 的提供厌氧环境， 但 依然需要一个固定场所和氮气瓶才能够实现厌氧的环境。 [0005]中国实用新型专利202022513468.4公开了一种新型厌氧培养箱， 通过在 培养槽内 设置点火器， 通过氢气储存罐内的氢气为燃料对箱体内的氧气进行燃烧， 在厌氧菌生长过 程产生氧气时， 能及时通过对氧气的燃烧， 避免氧气含量过多， 影响厌氧菌的生长， 在培养 槽内设置营养水， 通过水压作用使得水体时刻对投液口进行密封， 保证密封的同时， 可通过 投液口向培养槽内注射营养物质， 及时对厌氧菌提供养分。 该专利的特点是需要借助氢气 的燃烧才能够实现厌氧环境。 [0006]中国实用新型专利202120909469.2公开了一种厌氧培养器。 包括乳胶手套、 工作 台和安装在工作台顶部的厌氧培养箱。 该公开的特点是能保证乳胶手套留在厌氧培养箱内 部， 解决了传统乳胶手套吊在外 部容易损坏的问题， 对乳胶手套起到 了良好的保护作用。 [0007]如上所述， 已有的厌氧培养板、 培养皿均 需要放置在无氧容器或厌氧袋中。 然而， 这些技术的缺点在于： 使用厌氧培养箱， 存在结构复杂、 成本过高的缺点。 如果使用厌氧产 气袋或厌氧袋进行培养， 所述气袋一般具有固定的规格和大小， 每次只能够对固定体积的 空气进行厌氧处理， 与待培养的生物细胞数量多少无关， 且一旦封闭之后， 无法对培养过程 中的生物细胞状态进行监测。 同时， 如果只有单个培养板、 培养皿的话， 可以观察到菌落的 生长， 如果同时培 养多个培 养板、 培养皿， 则只能看到最外侧平板上的菌落 生长状态。 [0008]此外， 上述厌氧培养容器均存在产品体积过大， 不适宜野外取样和培养。 一直以 来， 在野外环境中进行厌氧微生物的取样与培养一直都很困难。 其难点就在于很难在取样 的同时给予样本提供厌 氧的环境， 而众所周知， 一旦脱离了厌氧环境， 大部 分厌氧微生物都 容易死亡。 因此， 为野外或其他没有培养条件的环境下 的采样样本提供一个厌氧环境和厌 氧的培养环境对于厌氧微 生物的取样以及后期的培 养而言是至关重要的。 [0009]因此， 对于野外取样和快速厌氧培养的需求， 现有技术中尝试改造培养板、 培养皿 来实现厌 氧培养。 例如， 中国发 明专利申请2011103309738公开了一种一次性厌 氧菌培养平 板， 包括皿体、 皿盖和托盘， 其中托盘设在皿体和皿盖之间， 其上端放置除氧透气袋和二氧 化碳生成袋。 该发明的技术思路在于， 通过托盘上的除氧透气 袋吸收氧气， 二氧化碳生 成袋说　明　书 1/6 页 3 CN 115109680 A 3