(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210958851.1 (22)申请日 2022.08.10 (66)本国优先权数据 202110916923.1 2021.08.1 1 CN (71)申请人 江苏汇先医药技 术有限公司 地址 215301 江苏省苏州市昆山市玉山 镇 中华园西路1798号12号房4层、 5层 (72)发明人 颜菁　侯舒捷　彭靖元　王伟　 (74)专利代理 机构 苏州创元专利商标事务所有 限公司 3210 3 专利代理师 李萍 (51)Int.Cl. C12M 1/00(2006.01) C09D 171/02(2006.01) C09D 105/08(2006.01) (54)发明名称 适于捕获稀有细胞的捕获装置及其制备方 法 (57)摘要 本发明公开了一种适于捕获稀有细胞的捕 获装置及其制备方法。 一种适于捕获稀有细胞的 捕获装置， 包括至少表层为金属的基材、 设于所 述基材表 面的涂层及连接于所述涂层的捕获物， 所述捕获物能够特异性地和目标稀有细胞结合， 所述涂层包括巯基聚乙二醇羧基和巯基化物。 本 发明能够降低背景细胞、 蛋白的非特异性吸附， 提高所捕获的靶细胞的纯度。 权利要求书1页 说明书8页 附图2页 CN 115521851 A 2022.12.27 CN 115521851 A 1.一种适于捕获稀有细胞的捕获装置， 包括至少表层为金属的基材、 设于所述基材表 面的涂层及连接于所述涂层的捕获物， 所述捕获物 能够特异性地和目标稀有细胞结合， 其 特征在于， 所述涂层包括巯基聚乙二醇羧基和巯基化物。 2.根据权利要求1所述的捕 获装置， 其特征在于， 所述巯基聚乙二醇羧基和巯基化物的 投料重量比为12： 1～1： 2。 3.根据权利要求1所述的捕 获装置， 其特征在于， 所述巯基聚乙二醇羧基的重均分子量 为0.11～29kDa。 4.根据权利要求1所述的捕 获装置， 其特征在于， 所述巯基聚乙二醇羧基包括具有第 一 重均分子量的巯基聚乙二醇羧基和具有第二重均分子量的巯基聚乙二醇羧基， 第一重均分 子量为11～29kDa， 第二重均分子量 为1～9kDa。 5.根据权利要求4所述的捕 获装置， 其特征在于， 具有第 一重均分子量的巯基聚乙二醇 羧基和具有第二重均分子量的巯基聚乙二醇羧基的摩尔比为(1～3)： (1～3)。 6.根据权利要求4所述的捕 获装置， 其特征在于， 所述巯基聚乙二醇羧基还包括具有第 三重均分子量的巯基聚乙二醇羧基， 第三重均分子量为0.1～0.9 kDa， 具有第一重均分子量 的巯基聚乙二醇羧基、 具有第二重均分子量的巯基聚乙二醇羧基、 及具有第三重均分子量 的巯基聚乙二醇羧基的摩尔比为(1～3)： (1～3)： (1～3)。 7.根据权利要求1所述的捕 获装置， 其特征在于， 所述巯基化物为巯基化透 明质酸钠或 巯基化海藻酸钠； 所述巯基化物的巯基化率为5～45％， 所述巯基化物的分子量为5～ 200kDa。 8.根据权利要求1所述的捕 获装置， 其特征在于， 所述基材包括筛网、 板或微流控芯片； 和/或， 所述捕获物包括蛋白、 核酸中的至少一种； 和/或， 所述稀有细胞为免疫细胞； 和/或， 所述涂层通过 先后在基材的表面上孵 育巯基化物和巯基聚乙二醇羧基形成。 9.根据权利要求1所述的装置， 其特征在于， 所述基材为筛网， 所述筛网包括不锈钢筛 网骨架和孵育所述不锈钢筛网骨架表面上的金层， 所述筛网的孔径为10 μm～50 μm； 所述涂 层包括巯基聚乙二醇羧基和巯基化透明质酸钠， 所述巯基聚乙二醇羧基包括重均分子量为 15～25kDa的巯基聚乙二醇羧基、 重均分子量为1.5～2.5kDa的巯基聚乙二醇羧基及重均分 子量为0.1～0.9kDa的巯基聚乙二醇羧基； 所述捕获物为能够和免疫细胞特异性结合的抗 体。 10.一种如权利要求1至9任一项所述适于捕获稀有细胞的捕获装置的制备方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： 在基材表面上先孵育巯基化物再孵育巯基聚乙二醇羧基， 或在基材 表面上先孵育巯基聚乙二醇羧基再孵育巯基化物， 以在基材表面上形成涂层； 在涂层上连 接捕获物。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115521851 A 2适于捕获稀有细胞的捕获装 置及其制备方 法 技术领域 [0001]本发明属于生物技术领域， 涉及一种适于捕获稀有细胞的捕获装置及其制备方 法。 背景技术 [0002]稀有细胞是指生物样本中存在的数量稀少却具有重要生物学功能或临床检测意 义的 细胞。 稀有细胞的传统捕获方法有Cell  Search类的免疫捕获富集、 物理富集等。 在 稀 有 细胞的富集过程中， 背景/杂细胞干扰稀有细胞的捕获及判断， 同时影响到捕获到稀有 细 胞的纯度。 目前， 一些捕获筛等捕获装置上添加有物理涂层和化学涂层来提高细胞的捕   获效率， 其中， 物理涂层的结合强度低； 而化学涂层不可逆， 捕获的稀有细胞释放困难；  另 一方面， 在捕获靶细胞的同时， 背景细胞也会吸附到捕获筛上， 所捕获的稀有细胞的  纯度 较低； 此外， 捕获装置会对稀有细胞有不同程度的损伤； 这些因素都会影响捕获细  胞的活 性及下游应用。 [0003]本申请人于2020年提出了一种捕获筛， 参见CN111175503A， 该捕获筛包括筛网骨   架和设置于所述筛网骨架上的捕获物， 所述捕获物能够与目标细胞或生物分子特异性结   合， 所述筛网骨架具有金属原子， 所述的筛网骨架和所述捕获物之间通过巯基化物质连   接， 其中巯基化物质与所述筛网骨架通过反应形成金属 ‑硫键而结合， 巯基化物质与所述   捕获物通过反应形成酰胺键而结合； 所述巯基化物质为巯基化海藻酸钠和巯基化透明质   酸中的一种或两种的组合。 该捕获筛能够方便地将捕获的细胞洗脱， 但是用于富集稀有  细 胞时， 背景细胞也会吸附到捕获筛上， 捕获的目标稀有细胞的纯度较低。 发明内容 [0004]针对上述技术问题中的至少一个， 本发明的目的是提供一种适于捕获稀有细胞的 捕 获装置及其制备方法， 该装置能够降低背景细胞、 蛋白的非特异性吸附， 提高所捕获的   靶细胞的纯度。 [0005]本发明的第一个方面提供一种适于捕获稀有细胞的捕获装置， 包括至少表层 为金 属 的基材、 设于所述基材表 面的涂层及连接于所述涂层的捕获物， 所述捕获物能够特异 性  地和目标稀有细胞 结合， 所述涂层包括巯基聚乙二醇羧基和巯基化物。 [0006]优选地， 所述巯基聚乙二醇羧基和巯基化物的投料重量比为12： 1～1： 2。 更优选 地， 所述巯基聚乙二醇羧基和巯基化物的重量比为10： 1～1： 2， 进一步为5： 1～1： 1， 更进   一步为2： 1～1： 1。 [0007]优选地， 所述巯基聚乙二醇羧基的重均分子量为0.11～29kDa。 更优选地， 所述巯 基 聚乙二醇羧基由具有两种或两种以上 的重均分子量的巯基聚乙二醇羧基构成。 进一步 地， 第一种巯基聚乙二醇羧基的重均 分子量为11～29kDa， 优选为15～25kDa； 第二种 巯基 聚乙 二醇羧基的重均分子量为1.1～2.9kDa， 优选为1.5～2.5kDa； 第三种巯基聚乙二醇羧 基的重 均分子量 为0.11～0.29kDa， 优选为0.15～0.25kDa。说　明　书 1/8 页 3 CN 115521851 A 3