(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211191525.9 (22)申请日 2022.09.28 (71)申请人 苏州大学 地址 215000 江苏省苏州市吴中区石湖西 路188号 (72)发明人 时玉舫　房建凯　邵常顺　陈永井　 (74)专利代理 机构 苏州市中南伟业知识产权代 理事务所(普通 合伙) 32257 专利代理师 王玉仙 (51)Int.Cl. A61K 35/28(2015.01) A61P 1/00(2006.01) A61P 29/00(2006.01) C12N 5/0775(2010.01) (54)发明名称 一种治疗炎症性肠病的细胞药物 (57)摘要 本发明涉及一种治疗炎症性肠病的细胞药 物， 通过用琥珀酸盐处理经炎症因子刺激后的间 充质干细胞得到。 本发明通过使用琥珀酸盐体外 预处理间充质干细胞， 提升MSCs胞内HIF ‑1α的 蛋白水平， 增强细胞的糖酵解能力， 提高免疫抑 制因子的表达， 发挥干细胞免疫调控功能， 从而 实现低剂量MSCs治 疗炎症性肠病的目的。 权利要求书1页 说明书9页 附图2页 CN 115518077 A 2022.12.27 CN 115518077 A 1.一种治疗炎症性肠病的细胞药物， 其特征在于： 所述细胞药物通过用琥珀酸盐处理 经炎症因子刺激后的间充质干细胞 得到。 2.根据权利要求1所述的细胞 药物， 其特 征在于： 所述炎症因子包括 IFN‑γ和TNF‑α 。 3.根据权利要求1所述的细胞药物， 其特征在于： 所述间充质干细胞来源于骨髓、 脂肪 或脐带。 4.根据权利要求1所述的细胞药物， 其特征在于， 所述细胞药物由以下步骤制备得到： 将间充质干细胞在增殖培养基中进行传代培养， 选取20代以内的间充质干细胞， 加入炎症 因子和琥珀酸盐进行孵 育， 得到所述细胞 药物。 5.根据权利要求4所述的细胞药物， 其特征在于： 所述增殖培养基为含有胎牛血清和 bFGF的DM EM低糖培养基。 6.根据权利要求 4所述的细胞 药物， 其特 征在于： 所述炎症因子的浓度为10 ‑100ng/mL。 7.根据权利要求 4所述的细胞 药物， 其特 征在于： 所述 琥珀酸盐的浓度为10mM ‑50mM。 8.根据权利要求1所述的细胞药物， 其特征在于： 所述炎症性肠病为溃疡性结肠炎和克 罗恩病。 9.根据权利要求1所述的细胞 药物， 其特 征在于： 所述细胞 药物的剂型为注射剂。 10.根据权利要 求1所述的细胞药物， 其特征在于： 所述细胞药物的给药剂量为1 ‑2×105 个间充质干细胞/kg。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115518077 A 2一种治疗炎症性肠病的细胞药物 技术领域 [0001]本发明涉及生物制药技 术领域， 尤其涉及一种治疗炎症性肠病的细胞 药物。 背景技术 [0002]炎性肠病又称炎症性肠病(IBD)， 为累及回肠、 直肠、 结肠的一种特发性肠道炎症 性疾病。 临床表现为腹泻、 腹痛、 粘液血便， 甚至出现各种全身并发症如视物模糊、 关节疼 痛、 皮疹等。 炎症 性肠病包括溃疡性结肠炎(UC)和克罗恩病(CD)。 溃疡性结肠炎是结肠黏膜 层和黏膜下层连续性炎症， 疾病通常先累及直肠， 而后逐渐向全结肠蔓延 。 克罗恩病可累及 全消化道， 为非连续 性全层炎症， 最常累及部位 为末端回肠、 结肠和肛周。 [0003]炎症性肠病的病因和发病机制尚未完全明确， 目前已知肠道黏膜免疫系统异常激 活所导致的高炎症反应在IBD发病中起重要作用， 可能是由于多因素相互作用所致， 主要包 括环境、 遗传、 感染和免疫因素。 目前的治疗选择包括抗炎药(如美沙拉嗪)、 皮质类固醇、 免 疫调节剂(硫嘌 呤、 甲氨蝶呤、 环孢素等)和生物制剂(抗肿瘤坏死因子 ‑α )。 但是以上治疗方 法常伴有异常的毒副反应， 且不能实现对于疾病进 展的长期遏制。 [0004]间充质干细胞(mesenchymal  stem cells， MSC s)是广泛存在于机体大部 分组织中 的多能干细胞， 与个体生长发育、 组织稳态维持和器官损伤 修复密切相关。 MS Cs容易从成人 组织中分离得到， 包括脂肪组织和骨髓等， 并且由于它们已被证明具有免疫规避性， 现已成 为包括IBD在内的许多疾病的临床可行疗法。 MSCs上高表达的趋化因子受体诱导细胞向炎 症部位迁移， 随后通过分泌抗炎介质进 行免疫调节来抑制炎症。 但在临床试验中发现， 使用 间充质干细胞治疗炎症性肠病时， 如果注射的细胞数量过少， 就无法达成炎症性肠病治疗 的预期目标， 而随着注入干细胞数量的增多， 血栓风险大幅度增加， 此外细胞毒性也成倍增 强。 发明内容 [0005]为解决上述技术问题， 本发明提供了一种治疗炎症性肠病的细胞药物， 通过使用 琥珀酸盐体外预处理间充质干细胞， 提升MSCs胞内HIF ‑1α 的蛋白水平， 增强细胞的糖酵解 能力， 提高免疫抑制因子的表达， 发挥干细胞免疫调控功能， 从而实现低剂量MS Cs治疗炎症 性肠病的目的。 [0006]本发明的第一个目的是提供一种治疗炎症性肠病的细胞药物， 所述细胞药物通过 用琥珀酸盐处 理经炎症因子刺激后的间充质干细胞 得到。 [0007]进一步地， 所述炎症因子包括 IFN‑γ(干扰素 ‑γ)和TNF ‑α(肿瘤坏死因子 ‑α )。 [0008]进一步地， 所述间充质干细胞来源于骨髓、 脂肪或脐带。 [0009]所述的间充质干细胞是一种多能干细胞， 它具有干细胞的所有共性， 即自我更新 和多向分化能力。 骨髓间充质干细胞(BMS Cs)是一类起源于中胚层的成体干细胞， 也具有自 我更新及多向分化潜能， 可分化为多种间质组织， 如骨骼、 软骨、 脂肪、 骨髓造血组织等。 为 排除伦理问题， 本发明使用的是经伦理审查批准的人骨髓间充质干细胞， 包括商业化的人说　明　书 1/9 页 3 CN 115518077 A 3