ICS 67.050 B 50 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T 3039-2008 水产品中硫丹残留量的测定 气相色谱法 Determination of endosulfan residues in aquatic products by gas chromatography 行业标准信息服务平台 2008-08-07 发布 2008-08-07实施 中华人民共和国农业部 5发布 SC/T 3039—2008 本标准的附录 A为资料性附录。 本标准由中华人民共和国农业部渔业局提出。 本标准由全国水产标准化技术委员会水产品加工分技术委员会归口。 本标准起草单位：农业部渔业环境及水产品质量监督检验测试中心（广州）、中国水产科学研究院南 海水产研究所。 本标准主要起草人：甘居利、林钦、柯常亮、陈洁文、李刘冬、王增焕、古小莉、黎智广。 行业标准信息服务平台 SC/T 3039--2008 水产品中硫丹残留量的测定 气相色谱法 1 范围 本标准规定了水产品中硫丹残留量的气相色谱测定方法。 本标准适用于水产品中硫丹残留量的测定。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法。 SC/T3016水产品抽样方法。 3原理 捕获检测器的气相色谱仪测定α-硫丹、β-硫丹的残留量，保留时间定性，外标法定量。 4试剂与材料 4.1水：符合GB/T6682中一级水的要求。 4.2标准物质：α-硫丹、β-硫丹，纯度均≥99%。 4.3乙酸乙酯：色谱纯。 4.4弗罗里硅土：层析用，60目～100目，400℃加热4h，冷却至室温，于干燥器中贮存备用。 4.5中性氧化铝：100目～200目，400℃加热4h，冷却后按每100g加纯水4mL，振荡4h，密闭贮存或 贮于乙酸乙酯中。 4.6无水硫酸钠：分析纯，650℃加热4h，冷却至室温，于干燥器中贮存备用。 4.7玻璃层析柱：柱身长200mm，内径10mm，底部带砂芯滤层和磨口玻璃或聚四氟乙烯旋塞用6mL 乙酸乙酯（4.3）湿法装柱，自下而上依次装填弗罗里硅土（4.4)40mm、中性氧化铝（4.5）30mm、无水硫 酸钠(4.6)30mm。 4.8乙睛：色谱纯，室温存放。 4.10乙腈：色谱纯，一18℃保存。 4.11硫丹标准溶液 4.11.1混合标准贮备液 称取α-硫丹、β-硫丹标准物质各0.0250g，置于同一烧杯内，在室温下用乙酸乙酯（4.3)溶解，转人 容量瓶定容至50mL，摇匀，配成浓度各为500μg/mL的标准贮备液，5℃以下避光保存。 4.11.2混合标准中间液 为20.0 μg/mL的标准中间液。 4.11.3混合标准使用液 1 SC/T 3039--2008 为1.00μg/mL的标准使用液。 4.11.4混合标准系列溶液 在室温下分别取标准使用液0mL、0.10mL、0.20mL、0.40mL、0.80mL、1.20mL、1.60mL、 2.00mL，分别在10mL容量瓶中用乙酸乙酯（4.3）稀释定容，摇匀，配成浓度各为0ug/mL、 0. 001 μg/mL,0. 002 μg/mL.0. 004 μg/mL.0. 008 μg/mL,0. 120 μg/mL,0. 160 μg/mL,0. 200 μg/mL 的标准系列溶液。 5仪器设备 5.1气相色谱仪：配3Ni微电子捕获检测器。 5.2分析天平：感量0.0001g、0.01g。 5.3低温离心机：5℃～10℃,4000r/min以上。 5.4旋涡混合器。 5.5旋转蒸发浓缩器。 5.6超声振荡器。 5.7均质机。 5.8氮吹仪：水浴加热控温精度为士1℃。 5.9鸡心瓶：100mL，配磨口塞。 5.10离心管：10mL、50mL（配磨口塞）。 6测定步骤 6.1试样制备 按SC/T3016的规定。 6.2提取 称取均质试样3g（准确至0.01g），放人50mL具塞离心管中，加无水硫酸钠2g，用玻棒搅拌混匀， 加乙腈/乙酸乙酯溶液（4.9)15mL淋洗玻棒后浸泡试样30min后，超声波提取10min，于5℃～10℃以 4000r/min离心5min，将上层澄清提取液转入鸡心瓶，立即用玻棒引流上层澄清液入鸡心瓶。加乙 腈/乙酸乙酯溶液（4.9)10mL浸泡离心管中残渣10min，重复提取一次，合并提取液，在35℃水浴中旋 转蒸发至近干。 6.3低温除脂 向鸡心瓶内加人3mL乙睛（4.8），涡旋混合10s～20s，于18℃放置30min以上，使脂类杂质在 低温下冷凝在鸡心瓶内壁。 6.4柱层析净化 调节层析柱（4.7)底部旋塞，将柱内乙酸乙酯液面调整到硫酸钠层上方3mm～5mm,取出低温鸡 心瓶，并立即将鸡心瓶内的乙腈溶液转入层析柱，另用3mL一18℃乙腈（4.10)洗涤鸡心瓶内壁后转入 层析柱，用50mL乙腈/乙酸乙酯溶液（4.9)以1mL/min～1.2mL/min流速淋洗层析柱。洗脱液的前 10mL弃去,其余收集人鸡心瓶。 6.5浓缩 （4.3），涡旋混合10s～20s，洗涤离心管内壁。洗涤液转入色谱进样瓶，密封，及时进行气相色谱测定。 2 SC/T 3039—2008 6.6测定 6.6.1色谱条件 6.6.1.1石英毛细管色谱柱：HP-5型，规格30mX0.32mmX0.25μm，或性能相当者。 6.6.1.2柱箱升温程序：初始柱温160℃保持1min，然后以20℃/min速率升至220℃后保持7min，再 以30℃/min速率升至280℃后保持2min。 6.6.1.3进样口温度：260℃。 6.6.1.4检测器温度：310℃。 6.6.1.5进样方式：不分流。 6.6.1.6进样量：2.0μL。 6.6.1.7载气：高纯氮气（纯度≥99.999%），流速2.0mL/min。 6.6.1.8吹扫气：高纯氮气（纯度≥99.999%），流速60mL/min。 6.6.2标准曲线绘制 向气相色谱仪中注人系列标准溶液（4.11.4)，记录峰面积。以α-硫丹色谱峰面积为纵坐标，α-硫 丹浓度为横坐标，绘制α-硫丹的标准曲线。以β-硫丹色谱峰面积为纵坐标，β-硫丹浓度为横坐标，绘 制β-硫丹的标准曲线。α-硫丹、β-硫丹标准溶液的气相色谱图参见附录A图A.1。 6.6.3试样溶液测定 向气相色谱仪中注人试样溶液，记录峰面积，α-硫丹的响应值应在标准曲线的线性范围0.001μg/ mL～0.2μg/mL之内,β-硫丹的响应值应在标准曲线的线性范围0.001μg/mL～0.2μg/mL之内,根 据色谱峰的保留时间定性，用外标法定量。鳗加标试样、鳗缅试样的气相色谱图参见附录A图A.2 和图A.3。 6.7空白试验 在相同试验条件下，与试样测定的同批做空白试验，除不加试样外，按6.2～6.6.3步骤进行。 6.8计算 试样中硫丹含量按式(1)计算，计算结果需扣除空白值，并保留3位有效数字。 A, XCsi X V +A, X Cs2 X V X= :(1) Asi Xm As2 Xm 式中： X——试样中硫丹含量，单位为毫克每千克(mg/kg); A,试样溶液中α-硫丹的峰面积,单位为赫兹·秒(Hz·s); A2- 试样溶液中β-硫丹的峰面积,单位为赫兹·秒(Hz·s)； 标准溶液中α-硫丹的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL)； 标准溶液中β-硫丹的浓度，单位为微克每毫升（μug/mL)； As1-- 标准溶液中α-硫丹的峰面积,单位为赫兹·秒(Hz·s)； As2— 标准溶液中β-硫丹的峰面积,单位为赫兹·秒(Hz·s)； V- 试样溶液定容体积，单位为毫升(mL)； 试样质量，单位为克(g)。 信息服务平 m- 7方法灵敏度、准确度和精密度 7.1灵敏度 本方法最低检出限为α-硫丹0.0003mg/kg、β-硫丹0.0003mg/kg，最低定量限为α-硫丹 0. 001 mg/ kg、β-硫丹 0. 001 mg/ kg。 7.2准确度 3 SC/T 3039—2008 本方法α-硫丹添加浓度为0.001mg/kg~0.05mg/kg时，回收率为70%～120%；本方法β-硫丹 添加浓度为0.001mg/kg~0.05mg/kg时，回收率为70%~120%。 7.3 3精密度 本方法批内相对标准偏差<15%,批间相对标准偏差<10%。 4 SC/T 3039—2008 附录A (资料性附录) 硫丹气相色谱图 A.1硫丹标准溶液气相色谱图见图A.1。 Hz3 2 000 1750 α-硫丹 1 500 β-硫丹 1250 1 000 750 500 250 8 8 10 11min 7 图A.1硫丹标准溶液气相色谱图 A.2鳗硫丹加标试样气相色谱图(α-硫丹、β-硫丹添加量各为0.001mg/kg)见图A.2。 Hz j 240 230 α-硫丹峰高23.56Hz β-硫丹峰高32.77Hz 220 210 200- 190 8 9 10 图A.2鳗缅硫丹加标试样气相色谱图 (α-硫丹、β-硫丹添加量各为0.001mg/kg） A.3鳗骊试样气相色谱图见图A.3。