ICS 67.050 B 50 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T 3042-2008 水产品中16种多环芳烃的测定 气相色谱一质谱法 Determination of specified sixteen polycyclic aromatic hydrocarbons in 行业标准信息服务平台 2008-08-07实施 2008-08-07 发布 中华人民共和国农业部 3发布 SC/T 3042-2008 前言 本标准附录 A、附录B为规范性附录,附录 C、附录 D为资料性附录。 本标准由中华人民共和国农业部渔业局提出。 本标准由全国水产标准化技术委员会水产品加工分技术委员会归口。 本标准起草单位：宁波市海洋与渔业研究院。 本标准主要起草人：钟惠英、郑丹、杨家锋、段青源、朱励华、卓华龙、 行业标准信息服务平台 一 SC/T 3042-2008 水产品中16种多环芳烃的测定 气相色谱一质谱法 1范围 本标准规定了水产品中16种多环芳烃(PAHs)的气相色谱一质谱测定法。 本标准适用于水产品及水产加工品中萘、苞烯、苞、荔、菲、葱、荧葱、芘、苯并[a]葱、菌、苯并[b]荧 定。16种多环芳烃的中英文名称及缩写见附录A。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 SC/T3016水产品抽样方法 3原理 试样用氢氧化钾-甲醇溶液皂化，环已烷萃取，甲醇溶液清洗，硫酸溶液处理，硅胶柱净化，用气相色 谱-质谱联用仪测定，内标法定量。 4试剂和材料 除另有说明外，所用试剂均为分析纯。所有试剂经气相色谱-质谱联用仪检验不得检出多环芳烃。 4.1水：GB/T6682规定的一级水。 4.2正已烷：农残级。 4.3环已烷：农残级。 4.4甲醇。 4.5氢氧化钾。 4.6二甲基甲酰胺。 4.7硫酸：优级纯。 4.82mol/L氢氧化钾-甲醇溶液：称取112g氢氧化钾（4.5)用100mL水溶解后，用甲醇(4.4)稀释至 1 000 mL. 4.950%甲醇溶液：甲醇十水(50十50)。 4.10二甲基甲酰胺溶液：二甲基甲酰胺十水(90十10)。 4.1160%硫酸溶液：量取60mL硫酸(4.7)缓缓加人40mL水中,搅匀。 4.12无水硫酸钠：400℃烘4h，冷却后装瓶、密封，干燥器中保存。 4.13超纯硅胶：粒径60μm~200μm，130℃烘4h，冷却至50℃以下装瓶、密封，干燥器中保存。 4.14环已烷-二氯甲烷溶液：环已烷十二氯甲烷（80十20）。 1 SC/T 3042—2008 4.15多环芳烃混合标准贮备溶液(2000mg/L)：以二氯甲烷-苯溶液（1十1)为溶剂，萘、苞烯、苞、苏、 菲、葱、荧葱、芪、苯并[a]葱、菌、苯并[b]荧葱、苯并[k]荧葱、苯并[a]芘、节酚[1,2,3-cd]、二苯并[a， h葱、苯并Lg,h,16种多环芳烃的浓度均为2000mg/L。有效期1年。 4.16多环芳烃混合标准使用溶液（20.0mg/L)：准确吸取适量体积的混合标准备溶液（4.15），用正 已烷（4.2)稀释至所需浓度，2℃～8℃密封避光保存，保存期3个月。 4.17多环芳烃内标贮备溶液(500mg/L)：以二氯甲烷为溶剂,苞-Di1o（AC-Dio）、菲-Dio（PHE-D1o）、 菌-D12(CHR-D12）、苝-D12(PE-D12)浓度均为500mg/L。 4.18多环芳烃内标使用溶液（10.0mg/L)：吸取200μL内标贮备溶液（4.17)，在10mL容量瓶中用 正已烷配制成10.0mg/L的多环芳烃内标使用溶液，2℃～8℃密封避光保存，保存期3个月。 4.19多环芳烃混合标准工作溶液：吸取适量混合标准使用溶液（4.16)和适量内标使用溶液（4.18)用 正已烷配制成多环芳浓度为0.050mg/L、0.100mg/L、0.500mg/L、1.00mg/L、5.00mg/L、10.0 mg/L和含内标物浓度为2.00mg/L的混合标准工作溶液，2℃～8℃密封避光保存，保存期1周。 5仪器和设备 5.1气相色谱-质谱联用仪(EI源）。 5.2分析天平：感量0.0001g。 5.3天平：感量0.01g。 5.4旋转蒸发仪。 5.5氮吹仪。 5.6离心机：转速4000r/min。 5.7恒温水浴锅。 5.8皂化装置：250mL圆底烧瓶，上接300mm蛇型冷凝管和150mm分馏管。 5.9玻璃层析柱：内径20mm，长300mm，带聚四氟乙烯塞和2#石英砂芯滤板。 5.10分液漏斗：250mL，带聚四氟乙烯塞。 5.11圆底烧瓶：250mL。 5.12具塞刻度试管：5mL。 5.13组织捣碎机。 6试样制备 6.1鲜活水产品的试样制备：按SC/T3016规定执行。 6.2水产加工品的试样制备：抽取至少3个包装件，取试样400g捣碎混合均匀后分为2份，一份用于 检验，另一份作为留样。 7分析步骤 7.1皂化 准确称取已制成均匀肉糜的试样50g，准确到0.1g，置于250mL圆底烧瓶中，加人2mol/L氢氧 化钾-甲醇溶液（4.8)100mL，接好皂化装置，用80℃恒温水浴锅加热回流2h～4h。加热时，注意不要 爆沸。 7.2提取 将冷至室温的皂化液转移到250mL离心瓶中，4000r/min离心5min，上清液转移到250mL分液 漏斗中，用100mL环已烷（4.3)分2次清洗回流瓶，并转移到上述离心瓶中振摇1min，4000r/min离 2 SC/T 3042--2008 心5min后，环已烷层转移到装皂化液的分液漏斗中。振摇分液漏斗1min，静置分层后，将下层皂化液 转移到另一250mL分液漏斗中，并加入50mL环已烷，振摇1min，静置分层后弃去下层液体，合并环 已烷层。 7.3萃取净化 分别清洗提取液。每次振摇1min，静置分层后弃去下层液体。上层环已烷用300mL水分3次洗至中 性。环已烷经无水硫酸钠（4.12）脱水后转移到250mL圆底烧瓶中，40℃水浴旋转蒸发浓缩至约30 mL. 7.3.2对于经酸洗后色泽较深的样品，可采用如下净化方法：浓缩液转移到250mL分液漏斗中，加人 30mL二甲基甲酰胺溶液（4.10），振摇1min，静置分层，下层转移到另一250mL分液漏斗中。再次加 30mL二甲基甲酰胺溶液重复操作，合并二甲基甲酰胺溶液到同一分液漏斗中，加人50mL水、100 mL环已烷，振摇1min，静置分层，下层（二甲基甲酰胺-水)再次用50mL环已烷萃取后弃去。合并环 已烷层，经无水硫酸钠脱水后于250mL圆底烧瓶中，40℃水浴旋转蒸发浓缩至约30mL。 7.4硅胶柱净化 7.4.1装柱 称取6g超纯硅胶（4.13），用环已烷湿法装人玻璃层析柱中，待硅胶完全沉降后，加人2g无水硫酸 钠。打开活塞，将环已烷液面放至接近无水硫酸钠平面。 7.4.2洗脱 将7.3浓缩好的试样液加入硅胶柱中，用10mL环已烷分2次清洗浓缩瓶，清洗液一并加人柱中。 打开活塞，弃去流出液，当液面降至无水硫酸钠平面时，再加人40mL环已烷，当层析柱液面再次降至无 水硫酸钠平面时，关闭活塞，加50mL环已烷-二氯甲烷溶液（4.14)淋洗柱子，用圆底烧瓶收集洗脱液。 7.5浓缩 在经硅胶柱净化的试样液中加人内标使用溶液（4.18)100μL，40℃水浴旋转蒸发浓缩至1mL，转 移至5mL刻度试管中，用氮吹仪浓缩，并用正已烷定容至0.50mL。 注：低分子量的多环芳烃容易挥发，浓缩时不能蒸干提取液。 7.6测定 7.6.1仪器条件 色谱柱：DB-17MS石英毛细管柱，30mX0.25mm×0.25μm,或性能相当的色谱柱； a）包 b）柱箱升温程序：初始温度60℃，保持1min，以15℃/min升至110℃，保持1min，再以20℃/ min升至180℃，然后以2℃/min升至203℃，5℃/min升至250℃2℃/min升至310℃，保持 2 min; c) 进样口温度：260℃； d) 传输线温度：250℃； 离子源温度：230℃； 载气：氮气，纯度≥99.999%，流速1.0mL/min； 电离方式：EI； h）电子能量：70eV； j) 进样方式：无分流进样，0.75min后开阀； 进样量：2.0μL； 1) 溶剂延迟：7.0min。 3 SC/T 3042—2008 表1SIM模式下的选择离子序列 离子序列组编号 开始时间，min 选择离子,m/ z 7 127,128,129 2 10 151,152,153,154,160,162,164 3 12 165,166,167 17 80,94,188,176,178,179 4 5 24 101,200,202,203 29 120,236,240,226,228,229 6 7 41 125,252,253,260,264,265 8 54 138,276,277,278,279 7.6.2定性测定 根据色谱峰的保留时间并按照附录B中多环芳烃的定性离子进行定性分析，定性依据为： a）在相同的测试条件下被测样品色谱峰的保留时间与标准工作液相比，变化必须在士0.08min 以内; 每个组分至少要选择监测3个特征离子，被测样品的监测离子的相对丰度与标准工作溶液的 相对丰度两者之差应符合表2要求。 表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 单位