ICS 65.020.01 B 04 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3631—2020 茶叶中可可碱和茶碱含量的测定 高效液相色谱法 Determination of theobromine and theophylline in tea- High performance-liquid chromatography 行业标准信息服务平台 2020-07-27发布 2020-11-01实施 中华人民共和国农业农村部 发布 NY/T3631—2020 全国农业食品标准 食典通 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由农业农村部种植业管理司提出并归口。 本标准起草单位：中国农业科学院茶叶研究所、农业农村部茶叶质量监督检验测试中心。 本标准主要起草人：刘新、蒋迎、周苏娟、汪庆华、马桂岑、陈利燕、张颖彬、 行业标准信息服务平台 I NY/T3631—2020 茶叶中可可碱和茶碱含量的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了茶叶中可可碱、茶碱含量的高效液相色谱测定法。 本标准适用于茶叶中可可碱、茶碱含量的测定。 本方法可可碱的定量限为3.2mg/kg，茶碱的定量限为4.4mg/kg。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的P凡是期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件 2分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 6682 HING 磨碎试样的制备及其干物质含量测定 GB/T 8303 茶 3原理 茶叶试样中 可碱茶 碱用700热水提取经净化，过滤是容cm 的可 谱租 弟度洗脱分离， 271nm波长处测定 外标法 4 试剂和材料 除非另有说明 级水 4. 1 乙腈(C2 4.2 甲醇（CH 4.3甲酸(CH 4.4氢氧化钠（ ：1310-73-2) 4.5重质氧化镁 析纯氧化镁经900℃灼烧30mm 化镁，储存于干 燥器中。 os 4.6可可碱（C,Hg 纯度 ≥98 4.7茶碱(CHsN,O2 58-53 纯度 98% 4.8液相流动相B:取5 甲酸（4. 容 4.9标准储备溶液（1000mg 分别称取 g精确至0 1g）、茶碱（4.7)0.1g（精确 碱4 至0.0001g），用甲醇（4.2)分别定容至 至100mL（具中可可碱标准物质可先用少量2g/L的NaOH溶液溶 解）。配制好的1000mg/L的标准储备液储存 水箱，储包期6个月。 4.10混合标准工作液：分别准确移取10μL、20μL、50μL、100L、250L、500uL、1000uL可可碱和1 μL、2μL、5μL、10μL、20μL、50μL、100μL茶碱的标准储备溶液（4.9）用水或初始流动相稀释并定容至 10mL，得到一系列标准工作液（质量浓度分别为可可碱1mg/L、2mg/L、5mg/L10mg/L25mg/L50 mg/L.100mg/L和茶碱0.1mg/L.0.2mg/L,0.5mg/L、1mg/L.2mg/L5mg/L,10mg/L).0℃~ 5℃保存，保存期1个月。 4.11微孔滤膜：孔径0.45μm，水相。 5仪器设备 5.1高效液相色谱仪：配备紫外或二极管阵列检测器。 5.2分析天平：感量0.0001g和0.001g。 1